본 연구에서는 ursolic acid의 위의 보호효과를 위한 실험을 실시하였다. 위장 질병에 대한 ursolic acid의 효과를 확인하기 위해서 급성, 만성위염은 각각의 HCl·ethanol과 indomethacin에 의해 유도된 위염 동물 모델을 사용하여 관찰하였다. 대표적인 공격인자인 위산에 관해서는 PPI activity를 통해서 확인하였고, 위의 손상에 대한 보호인자에 관해서는, PGE2를 정량적으로 분석하였다. 항균활성 실험은 만성위염, 위궤양, 위암에 원인인자로 잘 알려진 H. pylori로 실험하였다. AGS cell를 이용하여 DAPI 염색, Flow cytometry assay를 통하여 ursolic acid가 위암세포의 apoptosis에 관여하는지를 확인하였다. 그 결과 ursolic acid 는 HCl·ethanol과 indomethacin에 의해 유도된 급성, 만성에 대한 위손상을 억제하였다. Ursolic acid는 위산분비의 마지막 단계인 위염분비효소인 proton pump를 억제시킴으 로써 산의 분비를 억제하였다. 그리고 ursolic acid는 위 점막의 보호인자인 PGE2의 농도가 증가함으로써 위 점막 보호 효과를 확인하였다. 또한 ursolic acid는 공격인자인 H. pylori colonization을 억제하였다. DAPI를 이용한 핵 염색에서, 대조군과는 달리, 핵 형상의 변형과 함께 수축 된 세포 또는 염색질의 응축현상이 관찰되었다. Flow cytometry assay에서 ursolic acid에 의해 apoptosis가 증가하는 것을 확인 하였다. 이를 통하여 ursolic acid는 위 손상에 대한 방어 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
해동피는 약리학적으로 진통, 소염작용이 있어, 허리와 무릎의 통증 등을 치료하는데 효과가 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 해동피(Kalopanax pictus)의 국산 및 중국산과 그 유사생약으로 사용되는 절동피(znthoxylum ailanthoides)의 국산과 중국산, 목면피(bombax malabaricum) 의 H2O 및 70% EtOH 추출물의 항위염 효과와 항산화효과에 대해 알아보았다. 먼저 HCl·EtOH로 유발한 흰쥐 위염 모델을 통해 효과를 확인하였고, 위염 및 위궤양, 위암의 원인으로 잘 알려진 H. pylori에 대한 colony 억제작 용과 대표적 공격인자인 과다한 산에 대한 억제작용을 확인 하고자 제산력 시험법을 실시하였다. 항위염 효과에 대한 항산화 기전으로는 DPPH 시험법, 환원력 시험법, β- carotene/linoleic acid syetem을 이용한 지질과산화 억제활성 시험을 실시하였고, 실험에 사용한 추출물 중 가장 효과가 우수한 해동피 국산 추출물을 이용하여 superoxide radical 및 hydrogen peroxide 소거 작용을 확인하였다. Indomethacin으로 유발한 흰쥐 위궤양 모델에서는 해동피 국 산 H2O 및 70% EtOH 추출물에서 각각 73.1%, 53.5%로 손상을 억제시킴을 확인하였다. 흰쥐를 이용한 gastric secretion 실험으로는 해동피 국산 H2O 및 70% EtOH 추출물이 위액의 분비를 줄이고, pH를 상승 시켰으며 총 산도를 감소시킴을 확인하였다. 그 결과, 해동피국산 및 중 국산, 절동피국산 및 중국산, 목면피중국산 해동피의 항산화 효과가 가장 우수하였으며 해동피 국산은 위염 및 위궤양에서 우수한 효과를 확인하였고, 건강 기능성 식품 및 천연물 의약품으로서의 개발 가능성을 확인할 수 있었다. 또한, 이 결과를 토대로 오랜 세월 한약재로 사용되어 온 해동피의 기원이 다른 유사품 및 불량약재의 무분별한 유통, 정확한 기원의 약재에 대한 기준 설정, 높아지는 한약재 수입 의존도에 따른 위품, 저질품의 혼입 방지와 객관적, 신뢰성 있는 표준규격 설정에 기여할 것으로 예상된다.
현재 대황은 지표성분의 규격이 한국, 일본과 중국이 다르고, 유통시장에서 대황과 종대황이 혼재되어 있으며 다 양한 기원식물이 혼재되어 수입되고 있다. 따라서 대황의 효능을 현대 약리학적으로 해석하는 과정을 통해 약재의 표준화, 과학화 및 위염에 대한 지표성분 검색에 기여할 수 있을 것으로 사료되어 Rheum tanguticum(당고특대황)과 그 비교생약으로 Rumex cripus(양제근), Rheum officinale(약용 대황), Rheum palmatum(장엽대황) 및 Rheum undulatum(종 대황)의 물 및 70% 에탄올 추출물을 비교하였다. 그 결과, 흰 쥐를 이용한 위염 모델에서 양제근 70% 에탄올 추출물 (73.2%)와 종대황 물 추출물(71%)이 각각 70% 이상으로 우수한 위손상 억제활성을 보여주었지만, 당고특대황의 70% 에탄올 추출물 투여시 91.8%로 실험군 중 가장 우수한 위염 억제 효과를 확인할 수 있었다. 공격인자로써의 산을 중화시킬 수 있는 능력을 알아보기 위한 제산력 시험법으로는 당고특대황 물 추출물과 70% 에탄올 추출물이 각 각 약 14.2%, 약 15.8%로 억제함을 알 수 있었다. 이 결과로 보아 양성대조군으로 사용한 hydrotalcite(49.9%)보다는 제산작용이 약하였지만 과량 혹은 장기간 복용하면 효과가 있을 것으로 생각된다. 소화성궤양, 위암 및 변연부 B 세포 림프종 발생에 있어 중요한 원인 인자로 밝혀졌고, 기능성 소화불량증, 위의 과형성 용종, 철결핍성 빈혈 등 기타 질환과의 연관성들이 제시되고 있는 H. pylori에 대 한 colonization 억제 활성을 확인한 결과 당고특대황의 70% 에탄올 추출물 100 μg/mL에서 H. pylori에 대한 항균 작용(+)을 확인할 수 있었다. DPPH 용액을 이용하여 free radical의 소거능을 IC50으로 나타낸 결과, 당고특대황은 물 및 70% 에탄올 추출물에서 IC50이 25.9 μg/mL, 5.8 μg/mL 로 양성대조군으로 사용한 L-ascorbic acid (IC50= 6.5 μg/ mL)와 유사한 free radical 소거능을 나타내었다. 이 결과로 당고특대황의 70% 에탄올 추출물이 휜 쥐 위염모델의 위손상을 가장 우수하게 억제하였으며 항산화 활성 또한 가장 우수한 것으로 확인되었다. 당고특대황의 성분인 chysophanol, chrysophanol-8-O-glc, desoxyrhaponticin desoxyrhapontigenin, emodin, isorhaponticin, 2-methoxy-4-hydroxyanthraquinone- 5-O-glc, physcion, piracetannol-3'-O-glc, resveratrol, rhaponticin 및 rhapontigenin을 이용하여 실험 한 결과로는 효성분들 중 physcion 100 μM과 rhaponticin 50 μM 및 100 μM에서는 실험에 사용한 성분들 중 비교적 우수한 colonization 억제작용(+)을 나타내었고, DPPH radical 소거 활성은 isorhaponticin, piracetannol-3’-O-glc, resveratrol 및 rhaponticin에서 IC50이 각각 129.5 μM, 94.1 μM 80.1 μM 및 104.6 μM로 확인되었다.
실험결과를 토대로 항위염 효과가 있는 우수한 약용식물로써 천연물 의약품개발 가능성을 확인하였고 나아가 한약재의 효능을 과학적으로 검증하고 한약재 표준화에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.
Protective effect of Corydalis ternata against the carbon tetrachloride-induced toxicity was investigated. Carbon tetrachloride(CCl₄) induces hepatotoxicity due to the reactive free radical(CCl₃*) generated by cytochrome P-450 enzyme. We examined effects of hexane, chloroform, butanol and water fractions prepared from the Corydalas ternata methanol extract. Rats were treated with those for 3 days, and liver microsomes and cytosols were prepared at 24 hour after last treatment. Hepatoprotective activity. of the water fraction was higher than that of other fractions. To examine mechanism of the hepatoprotective effect of Corydalis ternata, we measured contents of malondialdehyde(MDA), cytochrome P450(CYP), glutathione, calcium as well as the activities of NADPH-CYP reductase, glutathione S-transferase(GST), superoxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GPX) and catalase. The fraction inhibited production of MDA, content of CYP and calcium in liver of water fractions - treated rats as compared with those of CCl₄ treated rats. The GST activity was increased. We speculate that the O₂ radical scavenging activities of the water fraction might play a key role in the mechanism opposing the progression of CCl₄ induced hepatotoxicity, but the activities of SOD, GPX, CAT were decreased. These results suggest that the mechanism might be mainly due to the decrease of CYP contents, act as calcium channel Mocker and increase of GST activity rather than O₂ radical scavenging activities.
Propolis, a natural resinous compound collected from honey bees, contains many biochemical constituents and has been used in traditional medicines as early as 300 B.C. Recently, it has been reported to possess many biological activities such as antibacterial, antiviral, fungicidal, local anaesthetic, immunostimulating, antiinflammatory and free radical scavenging properties. This study was performed to investigate the pharmacological effects of the propolis extract and fractions on the gastric lesion and ulcer. The ethanol extract was fractionated with hexane, toluene and ethyl acetate. Followed by bioassay on antigastric and antiulcer activity. Propolis ethanol extracts(500, 750, 1,000, 1,500 and 2,000 mg/kg) showed the protective effect on HCl ethanol-induced gastric lesion and the antisecretory effect against Shay's gastric secretion in pylorus-ligated rats in a dose related manner. In the animal models of HCl ethanol, aspirin-induced gastric lesion and Shads gastric secretion, the hexane and toluene fraction of propolis significantly reduced the length of gastric lesion and the acid secretion. These data showed that the gastric protective effects of propolis might result from reduction of acid secretion through the inactivation of H^+/K^+ATPase activity.
Previous studies have shown that methanol extract and its butanol fraction of Carthamus tinctorius L. Semen have the hepatoprotective effect on the CCl₄ induced hepatotoxicity. The hepatoprotective effect of the subfractions of butanol fraction has been evaluated by analyzing oxygen free radical scavenging enzyme activities and histopathological examinations. In BS-5 subfraction treated group, the activity of superoxide dismutase has been significantly increased as compared with that of CCl₄ treated rats. Antioxidant activity has been evaluated by the examination of the scavenging activity against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical. BS-5 subfraction has shown strong antioxidant activities. The histopathological examination showed that the treatment of BS-5 subfraction has relieved the ballooning degeneration of hepatocytes which had been generated by CCl₄. It appears that the protective effect of BS-5 subfraction would be mediated of the attenuation of lipid peroxidation by acting as a free radical scavenger, which were based on the increase of superoxide dismutase activity.
Previous studies have shown that methanol extract and its butanol fraction of Carthamus tinctorius L. Semen have the hepatoprotective effect on the CCl₄-induced hepatotoxicity. The hepatoprotective effect of subfractions has been evaluated by analyzing blood and hepatocyte biochemical analyses and biotransformation enzyme analyses. Treatment of BS-5 subfraction has significantly decreased the activities of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase. In addition, the levels of cholesterol and triglyceride in liver have been decreased as compared with that of CCl₄ treated rats. The hepatoprotective effect of BS-5 subfraction on the CCl₄-induced hepatotocicity would be mediated of the attenuation of the level of cytochrome P450 and the enhancement of the activity of glutathion S-transferase.
The acetaminophen (APAP), an antipyretic and analgesic agent, induces the hepatotoxicity by increasing influx of calcium and destabilizing the cellular membrane which can be caused by N-acetyl p-benzoquinoneimine generated by cytochrome P-450 (CYP-450) when it is overdosed. Diltiazem (DIL), a calcium channel blocking agent, has been known to suppress the CYP-450 activities. To study the effect of DIL in APAP treated rats, the serum biotransformational enzyme analyses and the liver histopathologic examination were conducted on the rats which had been administered DIL at 3, 6, 9 and 12 hours after the 3,000 mg/kg of APAP administration. Following a single dose of DIL administered 12 hours after APAP administration, serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activities, malondialdehyde and calcium contents of liver and microsome were significantly reduced. Glutathione S-transferase (GST) activity was significantly increased. Histopathologic studies showed that DIL had prevented the development of centrilobular necrosis induced by APAP in liver tissue. Our results suggested that diltiazem could inhibit the formation of free radical and the influx of calcium and could increase GST activity. Therefore, diltiazem can be administered at the time of 12 hours after overdosed APAP to diminish the liver damage.