피부의 피부 노화, 질환, 훼손은 내부적인 요인으로서 활성산소라는 사실이 밝혀진 이래로 합 성 항산화제를 대체할 수 있는 천연물 항산화제에 대하여 많은 연구가 진행 중이다. 이들 중에 지실은 오래전부터 만성적인 염증, 알리지 완화, 황산화 기능을 하는 것으로 알려져 왔다. 미생물을 이용한 발 효는 조직에 결합 되어 있는 생리활성 물질의 유리로 생체이용율(bioavailability) 훨씬 높아지는 것으로 알려 졌다. 따라서 본 연구는 지실 열수 추출물을 기질로 GRAS 알려진 균주를 이용하여 발효를 수행하 고 발효가 항산화 능력에 미치는 영향에 대하여 알아보고자하였다. 지실 열수 추출물은 항산화 기능을 가지고 있는 hesperidine, naringine, luteoilin, imperatorin등의 플라보노이드 및 furocoumarin등이 동정 이 되었고 함유량은 hesperidine naringine, imperatorin, luteolin 순이었다. 열수 추출물을 기질로 하여 분리된 Leuconostocs sp. strain JYK로 발효를 수행한 결과 지실 열수 추출물을 사용한 경우에는 71.2±4.58 (mg/g)의 총 페놀 함량이 있는 것으로 측정이 되었고 반면에 발효 추출물에는 89.2±13.47 (mg/g)으로 약 25.3% 증가된 것으로 나타났다. 총 플라보노이드 화합물은 지실 열수 추출물에는 25.1±4.12 (mg/g)의 총 플라보노이드 함량이 있는 것으로 측정이 되었고 반면에 발효 추출물에는 31.0±4.06 (mg/g)으로 약 23.5% 증가된 것으로 나타났다. DPPH 소거능은 지실 열수 추출물에는 70.9% 반면에 발효 추출물은 86.2% 측정이 되었다. 총 항산화 능력은 18.7% 발효추출은 26.6%로 발 효를 통하여 약 40% 증가하였다. 따라서 미생물 발효를 통하여 천연물에 포함이 되어있는 기능성 물질 에 대한 생체 이용률을 높인다면 산화적 스트레스에 의한 피부 노화 완화 및 개선 작용으로 기능성 화 장품 및 식품의 소재로 활용 가치를 높여 줄 것으로 기대를 한다.
This study examined the effects of trifoliate orange extract (TOE) on inflammatory reactions at the time of an LPS shock by performing experiments on rats injected with trifoliate orange extract and in Raw 264.7 cell cultures, with the aim of developing a new anti-inflammatory medicine. The IL-1β, IL-6, and TNF-α concentrations were lower in all of the groups treated with TOE than in the control group after 5 h of LPS treatment. The IL-10 concentration was higher in the 300- ㎎/㎏ TOE group than in the control group after 2 h and 5 h of LPS treatment. The liver concentrations of cytokines IL-1β and IL-6 decreased more in the groups treated with TOE than in the control group and the IL-6 concentration did not differ significantly between the 100-㎎/㎏ TOE group than in the control group. The TNF-α and IL-10 concentrations did not differ significantly between the TOE groups and the control group. In the experiments involving Raw 264.7 macrophage cultures subjected to LPS shock, the productions of IL-1β, IL-6, and TNF-α decreased in all of the groups treated with TOE compared to the control group. The IL-10 concentration did not differ significantly between the groups treated with TOE and the control group. Together the findings of this study suggest that TOE contains functional substances that can influence inflammatory reactions.
The Ponciri fructus immaturus (Poncirus trifoliata Rafinesque) has been used in oriental medicine for uterinecontraction, stomachache, abdominal distension and cardiovascular diseases. Two main compounds, poncirin and naringinwere successfully analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC) and carried out method validation accordingto ICH guideline. A successful resolution and retention times were obtained with a C18 reversed phase column, at an 1㎖min−¹ flow rate, with a gradient elution of a mixture of methanol, water and acetonitrile. Poncirin and naringin showed goodlinearity (R²>0.999) in relatively wide concentration ranged. The recovery of each compound was 95.81~101.48% withR.S.D. values less than 1.0%. The application of ultrasound-assisted extraction was shown to be more efficient in extractingponcirin and naringin from Ponciri fructus immaturus. The predicted optimal poncirin and naringin yield were poncirin2.15%, naringin 1.65% under an extraction temperature of 40℃, an extraction time of 10 min in a solvent of 70% methanol.
탱자나무(Poncirus trifoliata Rafinesque)는 운향과의 낙엽관목으로 건조된 미성숙 과실은 지실(枳實)이라는 한약 재료로 사용되며, 완숙된 탱자나무의 과실은 지각(枳殼)이란 한약자원의 대용품으로 사용된다. 미성숙된 탱자에 관해서는 항균, 항산화 및 지질저하 효과가 있다고 보고되어 있으나 완숙된 탱자에 대한 생리활성 효능에 대해서는 연구 된 바 없어 이에 본 연구에서는 과피, 과육, 과즙 그리고 씨로 분리하여 물과 에탄올을 용매
Poncirus trifoliata Rafinesque has been used as the immature fruit of the trifoliate orange tree. This study was carried out to investigate the quality change of Poncirus trifoliata Rafinesque depending on packing materials (vacuum packing, PP (polypropylene) packing, gunny sack packing), storage places and storage periods up to 12 months. The change of loss on drying content, content of poncirin were measured during the 12 months. As a result, the loss on drying content was decreased rapidly in gunny sack packing after storage of 12 months at room temperature. The content of poncirin was decreased generally according to storage conditions and its average loss percent was 38.8%.
탱자 추출액이 비만을 유도한 흰쥐의 지질강하 및 항산화효과에 미치는 영향을 검토했다. 혈장유리지방산 및 triglyceride 량은 대조군과 비교하여 탱자 처리군이 유의하게 낮은 값을 보였다. 그러나 정상군의 수준까지 나타내지는 않았다. 총콜레스테롤 및 LDL-cho.농도는 탱자 처리군 모두가 대조군보다 현저하게 하락한 값을 나타내었다. HDL-cho.은 대조군을 비롯하여 전 처리군에서 유의한 차이를 나타내지 않았다. 간장내 총콜레스테롤과 triglyceride량은 정자 처리군이 대조군 보다 현저하게 낮은 값을 보였다. 혈장 및 간장의 TBARS 농도는 탱자처리량이 증가함에 따라 감소하였다. GSH-Px, SOD 및 CAT 활성치는 탱자 처리군에서 높은 활성치를 보였다. 그러나 SOD의 활성치는 대조군과 유의한 차이를 나타내지는 않았다.
In this study, plant regeneration through in vitro culture from plantlet stems of Yooja (C. junos Sieb.) and trifoliate orange (P. trifoliata Rafin.) was attempted to make mass-production system of virus-free plants having the same genotype with mother plant. In order to investigate physiological change depending on the developmental stage of plant regeneration, the changes of total protein, peroxidase and esterase activity and their isozyme patterns as well were examined in 1/2 MS medium. The results are as follows : 1. The MS medium for the optimal callus induction and shoot formation was utilized. The medium was supplemented either with 2,4-D and Kinetin or with BA and NAA. The optimal concentrations were the combination of 1.0mg/ 2,4-D +0.3mg/ Kinetin and 1.0mg BA +0.3mg NAA in callus induction and shoot formation, respectively. 2. For the plant regeneration from somatic embryos, 1/2 MS medium was used with supplements of growth regulators (free, 1.0mg/ IBA +1.0mg/ BA ,0.5mg/ IBA +0.5mg/ BA). Shooting and rooting were the best in the treatment of 0.5mg/ IBA and 0.5mg/ BA combination. 3. The total protein content has a tendency of increase with the developmental stage of embryo, but it was decreased at the plantlet. Also it was the highest at 8 and 6 weeks stage in C. junos Sieb. and P. trioliata Rafin, respectively. In the SDS-PAGE pattern of protein, C. junos Sieb. showed bands of 29.0 and 40kDa at 10 weeks. The 45,66 and 97.4 kDa bands at 10 weeks of culture were shown in P. trifoliata Rafin. 4. The highest esterase activity was shown at the 6 and 8 weeks of culture in C.junos Sieb. and P. trifoliata Rafin.., respectively. 5. Esterase isozyme patterns were shown difference according to the developmental stage. In C. junos Sieb. a new band was observed at pl 7.7 following 4 weeks culture. On the other hand, new bands in P. trifoliata Rafin. were observed at pl 7.5~6.5 following 4 and 6 weeks culture, respectively.
본 연구에서는 탱자의 미성숙배로부터 캘러스 유도와 재분화에 관하여 연구하였다. 탱자 배발생 캘러스들은 3% sucrose와 44.4 μm BA로 처리된 ½MS배지에서 광조사(2,000 1x, 16h)시에 미성숙종자의 배로부터 유도되었으며 식물체 재분화는 MS배지에 5.0 μm BA를 첨가하였을 때 가장 양호하였다. 탱자는 배양2~3주경에 담황색의 캘러스가 유도되었으며 배양5~6주경부터는 딱딱한 녹색의 캘러스로 변하였다. 기내 재분화는 3% sucrose와 5.0 μm BA가 첨가된 MS배지에서 배발생 캘러스로부터 직접 유도되었다. 또한 배양 12주 후에 Multishoot가 재분화되었으며, 배양 16주 후에 뿌리가 형성되었다. 또한 뿌리가 형성된 식물체들은 토양으로 옮겨져 완전한 식물체로 잘 자랐다. 광학 현미경 관찰시 탱자에서는 배양4주경에 하얀색의 조밀한 배양된 세포들이 나타났다. 배양6주경부터는 세포들이 신장되면서 배발생 돌기가 나타났으며 주변의 세포들은 액포화 되었다. 또한 배양12주경에는 미성숙 잎에서 발달된 유낭과 전형성층을 관찰하였다.