In this study, gold nanoparticles (AuNPs) were synthesised using green chemistry to decorate multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) made from walnut shells transmission electron microscopy, field-emission scanning electron microscopy (FESEM), atomic force microscopy and fourier transforms infrared spectroscopy were used to diagnose MWCNTs and AuNPs. MWCNT-COOAu, MWCNT-COO and MWCNT-Au were diagnosed by Raman, energy dispersive X-ray analysis and FESEM. The effect of AuNPs, MWCNT-COO, MWCNT-COOAu and MWCNT-Au on pure and serum alkaline phosphatase (ALP) enzyme activity was studied in vitro using the enzyme-substrate 4-nitrophenyl disodium orthophosphate. For pure enzymes, Vmax slightly increased as the concentration of MWCNT-Au, MWCNT-COOAu and MWCNTCOO increased, whereas the Vmax values decreased as the concentration of AuNPs increased. The inhibition type for all NPs varied. For serum ALP enzyme, the Vmax values for Au-based NPs decreased as the concentration of NPs increased. The Vmax values exceeded the standard value at the concentrations of 25, 50 and 75 ppm for MWCNT-Au and MWCNT-COOAu, whereas the Vmax values increased over the standard value for all concentrations of AuNPs.
2017년 추계에 남해 전선역을 파악하고, 알칼리 인산분해 효소(Alkaline Phosphatase; APase) 활성을 이용하여 제한 영양염과 제한 영양염의 시간적인 변화를 평가하였다. 전선역이 형성된 인근해역의 경우, 용존무기인(dissolved inorganic phosphorus; DIP)의 농도와 용존무 기질소(dissolved inorganic nitrogen; DIN): DIP 비가 각각 0.2 μM 이하와 최대 23.2로, DIP가 제한된 환경임에도 불구하고 Chlorophyll a(Chl.-a)가 0.2 μg/L로 높은 생물생산력을 보였다. APase와 DIP는 중요한 역의 상관관계(r = -0.81; P<0.001)를 보여, DIP가 제한되어진 해역임을 알 수 있 었으며, APase와 Chl-a 관계는 APase의 60%가 식물플랑크톤, 40%가 박테리아 기원인 것으로 평가되었다. 용존태 APase와 입자태 APase의 분포로부터 전선역은 장기간 DIP가 제한된 해역이며, 그 외의 해역은 최근에 DIP 제한이 해소된 것으로 판단되었다. 따라서 전선역에서 APase와 같이 가수분해효소의 측정은 제한 영양염의 시공간적인 변화 특성을 평가할 수 있으며, 전선역에서 생지화학 순환의 이해를 높일 수 있을 것으로 생각된다.
Gingival fibroblasts (GF) are the most abundant cell type in periodontal connective tissues, andhave distinct functional activities in the repair of periodontal tissues and in inflammatory periodontal diseases. Human gingival fibroblasts (hGF) can be used for periodontal tissue engineering. This study examined whether the alkaline phosphatase of hGF is enhanced by recombinant human BMP-4 and/or Anti human BMP-4 antibody. hGF was obtained from the excised gingival tissue of an implant patient undergoing 2nd surgery. The tissue was incubated at 37℃ in 5% CO2 and 95% humidity, and the cultivating media was changed every 2 days. The 2nd passage hGF cells were cultured in a medium containing Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum and 1 X antibiotic antimycotic solution. The control hGF was cultured for 7 days without rhBMP-4/Anti human BMP-4 antibody. The experimental groups were cultured for 7 with BMP-4 (10 ng/ml) and/or Anti human BMP-4 antibody. This study evaluated the differentiation of hGF to osteoblasts using alkaline phosphatase assay. In the experimental groups, the hGF showed abundant positive ALP staining. Among the experimental groups, the experimental group 3 (mixture of rhBMP-4 (20ng/㎖) and Anti human BMP-4 antibody (50000ng/㎖) showed most abundant positive ALP staining. In the control group, the hGF showed weak positive ALP staining. Overall, these results suggest that the ALP expression of hGF can enhanced by rhBMP-4 or mixture of rhBMP-4/ anti human BMP-4 antibody.
The myotubularin (MTM) family constitutes one of the most highly conserved protein-tyrosine phosphatase subfamilies in eukaryotes. MTM1, the archetypal member of this family, is mutated in X-l띠ked myotubular myopathy, whereas mutations in the MTM related (MTMR)2 gene cause the type 4B Charcot-Marie-Tooth disease, a severe hereditary motor and sensory neuropathy. In this study, we investigated the role of pleckstrin homology (PH) domain of MTMR2. We demonstrate here that the PH domain of MTMR2 directly interacts with phosphatidylinositol (PtdIns)(3)P, PtdIns(5)P, and to a Iesser extent Pt,이 ns(4)P. Furthermore, MTMR2-PH domain is required for targe띠g Mη00 to the 다πoplasmic compartment. Mutation in the PH domain abolished its phospholipid binding ability and MTMR2 subcel1ular localization. These results su잃.est that the PH domain regulates MTMR2 1αalization and function through its interaction with phosphoinosi디des and give us the clue to understand the pathogenic effect of PH domain
당 대사에 관여하는 Pyruvate dehydrogenase phosphatase (PDP)는 해당과정에서의 대사 산물인 pyruvate를 acetyl CoA로 만들어 구연산 회로로 진입시켜주는 효소인 pyruvate dehydrogenase complex (PDC)의 활성을 조절하는 중요한 효소이다. PDP의 catalytic subunit는 PDC의 dihydrolipoamide acetyltransferase(E2), PDP regulatory subunit (PDPr), 그리고 칼슘 결합 도메인 등으로 구성되어 있는 것으로 추측되어지고 있다. 본 연구에서는 PDP 단백질을 분리정제하고 결정화 하고자 하였다. PDP는 catalytic subunit(PDPc, Mr 52,600 Da)과, regulatory subunit (PDPr 95,600 Da)으로 구성되어 있으며 칼슘 존재하에 PDPc는 dihydrolipoamide acetyltransferase(E2) component와 결합하여 기질인 인산 E1 component의 탈 인산화율을 증가시킨다. PDPc는 intrinsic 칼슘 결합부위를 가지며 두 번째 칼슘 부위는 E2 존재 하에 형성된다. 이러한 특이한 상호반응을 이용한 GSH-Sepharose-GST-L2 matrix를 이용하여 약 1000 U/㎎의 specific activity를 갖는 순수 PDPc를 약 80%의 yeild로 얻어 결정화에 사용하였다.
This study was conducted to obtain the transgenic Brnssica napus plants with tobacco Apase gene using the binary vector system of Agrobacteriurn fumefociens. The results obtained were summarized as follows: A repressible acid phosphatase gene of Saccharon
무당벌레(Harmonia axyridis)의 중장 내에서 먹이 단백질이 소화되는 과정을 연구하기 위하여 진딧물과 생간의 AP를 모델 단백질로 이용하였다. 천역 먹이인 긴꼬리볼록진딧물(Megoura crassicauda)과 인공먹이인 닭의 생간은 각각 고유의 acid phosphatase(AP)를 가지고 있으며, 무당벌레의 중장 내부로 들어온 후에도 활성을 나타내었다. 무당벌레의 장에서 자체적으로 생성하여 중장 내부로 분비하는 AP는 관찰되지 않았다. 무당벌레의 단백질 소화력은 먹이의 종류에 따라 차이를 나타내는 경향을 보였다. 생간의 AP는 무당벌레 중장내에서 12시간이 지나면 거의 활성을 잃어 버리나 긴꼬리볼록 진딧물의 AP는 24시간이 경과하여도 강한 활성을 나타내었다.
E. coli P90C 배양액중의 phosphatase는 ATPase로 대표될 수 있고 phosphatase 활성을 측정하기 위해서는 반응액과 30분이상 반응시켜야 안정된 발색도를 나타내었다. β-galactosidase의 생산을 위해 전배양에서 본배양으로 접종하는 시기는 phosphatase의 활성이 급증하기 직전(3hr)이 가장 좋았으며, 본배양에서 phosphatase 활성은 대수증식기에서 최고였으며, β-galactosidase가 생성되기 시작하면 phosphatase의 활성이 떨어지기 시작하는 것으로 나타났다.