형질전환 가축을 생산하기 위하여 최근 체세포 복제 기법을 이용하고 있다. 이러한 체세포를 이용한 형질전환 동물의 생산에는 체세포내에 유전자의 도입 효율이 직접적인 영향을 주게 된다. 따라서 본 연구는 세포내 유전자의 transfection 효율을 높이고자 한우의 체세포를 이용하여 여러 가지 조건에서 유전자 도입을 실시하였다. 세포내 유전자 도입 방법은 electroporation (EP) 방법을 이용하였다. 사용한 세포는 소의 귀세포(KbESF), 태아섬유아세포 (KbFF), 그리고 대조구로서 CHO cell을 이용하여 GFP 유전자를 도입하였다. EP는 0.4 cm cuvette을 사용하였고, voltage는 0.25 kV, 그리고 field strength 는 0.625 kV/cm 조건으로 실시하였으며, pulse times은 각각 1, 2, 또는 3회를 사용하였다. KbFF와 KbESF에서는 각각 pulse times을 증가시킬수록 유전자도입 세포수가 증가하였으나 (KbFF: 81, 634, 1,065 cells/ cells, KbESF: 1,011, 5,567, 15,408 cells/ cells), CHO cell에서는 pulse times을 증가시킬 수록 오히려 유전자도입 세포수가 감소하였다 (CHO: 1,591, 687, 297 cells/ cells). 그리고 2주 동안 neo selection을 실시 한 결과 KbFF, KbESF, CHO에서 각각 93, 35, 184 colony가 선발되었으며, 이 중 65.6%, 8.6%, 4.3% 가 GFP 형광 발현 colony로 나타났다. 한편 CHO cell에서 transfection cell수가 감소된 것은 EP의 자극으로 인해 손상된 세포가 많이 발생한 것으로 나타났다. 또한 neo selection에서 선발된 colony중 GFP가 발현되지 않거나 일부만 발현되는 colony들이 많이 발생하였는데, 이것은 세포내 유전자가 transfection되지 않은 세포도 neo selection에서 선발된다는 것을 제시하고 있다. 따라서 체세포를 이용한 형질전환동물 생산을 위해서는 세포내 유전자 도입과 선발 과정에서 나타난 colony에 대하여 보다 엄격한 screen을 하는 것이 필요한 것으로 생각된다.

본 연구는 안정을 구매한 사합들 중 2 회 이상 구매 경험이 있는 187명올 대상으로 설문조사 하였으며 구매 안경원의 만족정도 재구매의도， 이용형태 등을 분석하여 안 경원의 경영자의 고객만족경영에 도움이 되는데 연구의 목적이 았다. 연구의 결과는 다음과 같다. 1. 대부분의 구매 고객은 안경원의 서비스에 대하여 만쪽하였으나 다수의 고객은 검안의 정확성에는 만족하지 않았다. 2 구매고객의 대다수가 재구매의도률 밝히고 있으나 구전에 의한 홍보효과는 많지 않은 것으로 나타났다. 3. 조사대상고객 중 67명이 이용 안경원올 변경한 경험이 있으며 이을이 말하는 변 경이유는 불친절한 안경사 9명 03.0%) ， 불친절한 서비스 13 명 08.8%) ， 불편한 안경 23 명 (33.3%) ， 불편한 접근성 19명 (27.5%) ， 기타 (7.2%) 로 나타났다. 또한 그들이 디-사 톨아옹 이유로는 변안한 분위기 6 명 (8.8%) ， 편리한 접끈성 21 명 (30.9%) ， 편안한 안경 15 명 (22.1%)， 친절한 안경사 19명 (27.9%) ， 쾌적한 시설꽁간 2 명 (2.9%) ， 우수한 검안시 설 2 명 (2.9%), 기 타 3 명 (4.4%)으로 나타났다. 본 연구의 결과 안경원의 구매고객의 인구통계학적 분석이 안경왼의 경영전략에 도웅이 될 수 있올 것으로 보이며 구매고객의 검안에 대한 신뢰성 부족올 안경원 경 영자가 극복하기 위해서는 종사 안경사의 지속적이고 다양한 검안 교육올 통하여 안 경사의 검안능력을 향상시켜야 할 것이다. 또한 안경사의 검안 능력올 고객들에게 인 식시키기 위한 홍보 프로그램의 개발이 필요하다. 재구매의도를 밝힌 고객들일지라도 주위의 사람들에게 적극적인 구전에 의한 광고 를 하지 않는다는 점을 인식하여 만족 고객이 고객 유인으호 이어지도록 하눈 촉진 프로그랩을 개발할 필요성이 였다. 더불어 변경고객의 변경이유 중 불편한 접끈성과 불편한 안경에 주목하여 안경사의 휘탱 교육 및 사후 AlS 프로그랭의 개발도 필요 하다. 또한 안경사에 대한 친절교육으로 고객을 만족시키려는 노력이 필요하다.

안경원의 경쟁이 섬화되는 상황에서 안경원의 고객들을 만족시켜 재구매률 유도하 는 방어적인 마케탱전략이 요구되어왔다. 안경원에서 2회 이상 안경을 구매한 경험올 지닌 안경원의 고객 187명을 대상으로 방문 안경원의 고객만족， 재구매의도 그리고 전환장벽 둥에 대하여 설문지 조사법을 실시하였다. 고객만족을 인적서버스만족과 시 설서비스만족으로 구분하였고 고객을 전환장벽의 높고 낮음에 따라 고객을 분류하여 집단 간에 인적서버스만족과 시설서버스만족이 재구매의도에 마치는 영향이 차이가 있는지를 검정하였다.

This study was done to examine the relationship between serum chemical values (urea nitrogen, glucose, total protein and cholesterol) of recipients and pregnancy rate following embryo transfer. Blood samples were taken from 184 Holstein heifers or cows on Day 6 or 7 (Day 0=day of estrus) to analysis for serum urea nitrogen, glucose, total protein and cholesterol concentrations. After selection of recipients, frozen Holstein embryos were thawed and directly transferred to recipients non-surgically. The average serum concentrations of urea nitrogen, glucose, total protein and cholesterol were 13.8 mg/dl, 56.5 mg/dl, 7.2 mg/dl, 124.8 mg/dl, respectively. The average concentrations of serum urea nitrogen and cholesterol were lower (P<0.05) in pregnant recipients (10.7 mg/dl, 99.2 mg/dl) than in non-pregnant recipients (13.0 mg/dl, 122.2 mg/dl), respectively, although the concentrations of glucose and total protein were not different. These results show serum urea nitrogen and cholesterol concentrations can be used important factors for selection of recipients in Holstein.

The ovaries of 178 Holstein heifers or cows (heifer; 41, 1 parity; 72, 2 parity; 65) on Day 6 or 7 (Day 0=day of estrus) were examined by transrectal ultrasonography. Diameter of corpus luteum (CL) and large follicle ( 10 mm), and luteal tissue area were determined by ultrasound system with a 5 MHB rectal probe. Blood samples were taken to progesterone analysis. After selection of recipients, frozen Holstein embryos were thawed and directly transferred to recipients non-surgically. The diameter of CL and luteal tissue area was greater (P<0.01) on Day 7 than on Day 6 in heifers, 1 parity or 2 parity cows, respectively, although progesterone concentrations were not different. The presence of fluid-filled luteal cavitied or multiple CL (2 or more) did not affect serum progesterone concentration. A large follicles were observed in 67.4% of heifers or cows and the average diameter was 14.1 mm. Greater luteal tissue area attributed higher pregnancy in heifers, but not in cows, although there were no difference on pregnancy rate according to progesterone concentration in heifers or cows. The pregnancy rate of recipients contained a large follicle at embryo transfer was lower than that of recipients not contained. These results show ultrasonic assessment of ovaries in Holstein recipients is a reliable tool to determine the follicle and CL for recipient selection.

This study was carried out to establish an effective embryo production system by analyzing several factors ifluencing in vivo embryo production in Hanwoo. The results are summarized as follows : 1. The number of total, fertilized and transferble embryos by gonadotropins were no significant difference among PMSG, FSH and FSH+PMSH. 2. The numbers of recovered and transferable embryos by type of FSH were no significant difference in both FSH-P and FOLLTROPIN-V but significant difference with SUPER-OV(p<0.01). 3. The numbers of recovered and transferable embryos by age of donor were highest in 5 years old. 4. The recovered number of transferable embryos was highest in the cows at the 1 st and 3rd parity but significantly lower in hifers and the cows at more than 6th parities(p<0.01). 5. The numbers of trasferable embryos by postparient were more<270 days than > 270 days in significant difference(p<0.01). 6. Embryo production after treatment of repeated super ovulation was no significant difference. 7. Recovered and trasferable embryos production after treatment of repeated super ovulation interval was highest 81∼100 days and significant difference(p<0.01). 8. The numbers of recovered and transferable embryos by seasons were no significant difference.

This study was undertaken to test the hypothesis the hypothesis that treatment with hCG (5,000 IU) at the time of embryo transfer would enhance pregnancy rates in recipients, and the concentration of plasma urea nitrogen(PUN) in recipients was related to the effect of hCG on the reproductive performance. Blood samples were taken according to experimental condition for the assessment of the endogenous plasma progesterone concentration and plasma urea nitrogen. Concentrations of progesterone in plasma were higher in cows treated with hCG on day 7(estrus=day 0) than in those untreated during 7∼43 days after insemination. The pregnancy rates were 65.5 and 54.6% for the hCG treated and untreated groups, respectively. In recipient group categorized with PUN concentration of <12 mg/이, the pregnancy rates were 68.8 and 46.7% for the hCG treated and untreated groups, respectively. The results suggest that hCG treatment at 7 days after insemination could be used to increase the pregnancy rate of embryo transfer, and transfer, and only the recipients with PUN concentration of <12 mg/dl were influenced by treatment with hCG.

단안 PD 측정값에 영향올 줄 수 있는 사시안올 제외한 건강한 20 대 여성 32 명(1 9 -29 세)과 40대 이후 여성 71 명 (40-73세)올 대상으로 안경자와 각막반사식 동공거리 계로 왼용 PD와 주시거리 40cm 및 33cm에 대한 근용 PD훌 측정하였으며， 근용 PD 측정값은 왼용 PD 측정값으로부터 계산된 근용 PD값과 비교하였다. 20 대 여성 군에서 안경자로 측정한 원용 PD값이 각막반사식 동공거리계로 측정한 값보다 더 높았다. 20 대 여성군과 40대 이후 여성군에서 각막반사식 동공거리계로 측정한 원용 PD 값과 주시거리 40cm에 대한 근용 PD값은 40 대 이후 여성군에서 더 높게 나타 났으며， 주시거리 33cm에 대한 근용 PD 값은 20 대 여성군이 더 높게 나타났으나， 유의성이 없었으며， 20 대 여성군과 40 대 이후 여성군에서 각막반사식 동공거리계로 측정한 원용 PD와 주시거리 40cm 및 33cm에 대한 근용 PD 값 모두 우안이 좌안 보다 더 크게 측정되었고 유의한 차이를 보였다. 또한 원용 PD와 근용 PD 의 차이는 20 대 여성군에서 2.52mm( 주시거리 40cm) 와 3.13mm( 주시거리 4O cm} 였으며， 40 대 이후 여성군에서 3.23mm( 주시거리 40cm) 와 4.03mm( 주시거리 4O cm} 였다.

The objective of this study was to apply the multiple ovulation and embryo transfer (MOET) program practically in dairy herds. Forty five superior Holstein cows ranked in 5% according to Type-Production Index(TPI) in Korea were selected as donors. The donors were superovulated with pFSH and the embryos collected from donors were frozen and preserved. The preserved embryos and frozen Holstein embryo imported from foreign country were thawed and transferred to recipients. The results obtained were as follows; 1. The total number of ova and freezable embryos collected per donor was 6.5 and 2.8, respectively. 2. The freezable embryos were obtained more(p<0.05) when the body condition score (BCS) of donors was in range of 2.50∼3.25(4.1) than in range of 3.50∼4.00(1.9), while the total number of ova was not changed. 3. The season affected on the collected number of freezable embryos(6.1 in winter, 4.5 in fall, 1.1∼1.5 in spring and summer, P<0.05), and the total number of obtained ova were more in winter than in other seasons(P<0.05). 4. Embryos were transferred to 343 recipients and 152 cows were confirmed pregnant(44.3%). 5. The higher pregnancy was obtained (P<0.05) when embryos were transferred in summer(53.3%) than in fall(36.0%), while the pregnancy rate was not affected by the origin and developmental stage of embryos, and the parity, BCS and estrus induction of recipients. From these results, the pregnancy rate was considered to be acceptable for the embryo transfer with domestic or imported Holstein embryos, however embryo production from superior Holstein donors was unsatisfactory for application of MOET scheme.

수풍각막곡률계. 자동각막곡률계 및 corneal topography system 의 신뢰도와 정확도 틀 비교 분석하였다. 정상인 32 명 (64 안)을 대상으로 최소 2 시간 이상의 간격을 두고 Tesl 및 Retest를 설시하였다. 각막곡률에 대한 표준 표기법을 디옵터굴절력 매트릭 스로 전환하여 각 기기에 대한 신뢰도와 정확도를 구하고 3 차원 그래프에 도시하였 다. B & L사 수동각막곡률계의 수평성분. 회선성분 및 수직성분의 선뢰성계수는 각 각 0.445. 0.1 47. 0.523. Canon사 RK -:-l 자동각막곡률계의 선뢰성계수는 0.1 75. 0.205 렛 0.278. Topcon사 KR-7100 P 자동각막팍률계의 신뢰성계수는 0.1 96, 0.128 및 0 .3 21 이 었다. 또한 EyeSys corneal analysis system 으로 얻은 simulated K -reading 의 선뢰성계수는 수평성분 0.301. 회선성분 0.257 및 수직성분 0.318 이며. Orbscan cor neal slit-scan system 의 신뢰성계수는 0.382. ()J72 및 0 .444 이었으며， 수평성분에서만 각 기기의 평균값이 차이가 있었다. Canon사 RK-3 자동각막꼭률계의 수평성분‘ 회선 성분 및 수직성분의 정확성계수는 0.3213. 0.3135 및 0 .436 이며. Topcon사 KR.-7100 P 자동각막곡률계의 정확성계수는 0.3713. 0.288 및 0.375 이었고. EyeSys corneal analysis system으로 얻은 simulated K -reading 의 정확성계수는 수평성분 0.447. 회선성분 0.341 및 수 직 성 분 0.550 이 며 . Orbscan corneal slit-scan system 의 정 확성 계 수는 0.610‘ 0.536 및 0.895 이었다. 각 기가의 정확도는 수평성분. 회선성분 및 수직성분 모두 차이가 있 었다. 약주경선의 곡률반경은 B & L 수동각막곡률계 7.886 mm, Topcon KR 7100-P 7.86::3 mm. Canon RK -3 7.928 mm, EyeSys corneal topography system 7.879 mm 및 Orbscan corneal topography system 8.016 mm 였으며. Orbscan으로 측정 한 값이 다른 가기로 측정한 값보다 더 낀 것으로 나타났다. 그러나 강주경선의 곡률반경과 Mean K 값은 유의한 차이가 없었다.

This study was performed to improve the development of the in vitro fertilized bovine embryos by the condition of in vitro maturation. COCs were matured in TCM 199 supplemented with 0.1% PVA, 10ng/ml EGF, Hormones (5/ml FSH, 10 IU hCG, 1 /ml estradiol 17-) or granulsa cell+Hormones atmosphere 39, 5% CO2, 95% air for 24hrs. Matured oocytes were fertilized with frozen-thawed semen capacitated with 5mM caffein in BO medium for 20 hrs. IVF embryos were cultured in TCM 199 containing with hormones(same as matured medium), 10% FBS and co-culture with bovine oviduct epitherial cells. Maturation rates of COCs were showed 73.8%, 78.5%, 83.2% and 87.6% respectively, and were significant differences between PVA, EGF, and Hormones, GC+Hormones(p<0.05). The cleavage rates of IVF embryos were revealed 72.5%, 78.4%, 82.3% and 84.2% and showed same tendency as maturation rates(p<0.05). The blastocysts matured by above maturation condition and cultured for 7~10 days after fertilization had 34.4, 43.6, 52.3 and 59.3 cells had no differences among the treatments. These results suggest that high molecules as a substitutes of serum and growth factor may induce nuclear resumption of COCs but we need more study to produce transferable IVF blastocysts by use of that agents.

This study was undertaken with three objectives : to determine the optimal time of blood collection for plasma urea nitrogen(PUN) analysis, to examine the frequency distribution of PUN levels in recipient herd and to relate concentration of PUN to conception rate in Hanwoo recipients. The relationship between PUN level and time postfeeding was examined for 5 individual cows. Mean concentration of PUN rose for 4hrs postfeeding and decreased to PUN level before feeding at 10hrs postfeeding. And then, the blood for PUN analysis was collected at the time before feeding in next experiments. The ratio of cows with PUN concentration of < 12, 12∼18 and 18mg/dl were 50.6, 39.9 and 9.5% in 163 recipients, individually. The pregnancy rate of cows with PUN concentration 12∼16 mg/dl (63.3%) was higher than that of cows with PUN concnetration < 12 mg/dl (46.7%) or > 16mg/dl (42.9%). There results suggest that the PUN test may be beneficial for management of recipient herd in effects to maintain or improve reproductive efficiency.