Alternative substrate materials for mushroom cultivation must be developed due to the unstable supply of the currently used substrates. Threonine acts as a nitrogen source in the substrate used for cultivating mushrooms. Threonine influences food flavor and participates in lipid metabolism and protein synthesis as well as energy metabolism through the tricarboxylic acid cycle. In this study, mushroom cultivation substrate was supplemented with threonine to evaluate the effects of threonine on the growth characteristics of and secondary metabolites produced by Pleurotus ostreatus. Threonine supplementation induced substantial changes in the parameters indicating the quality of fruiting bodies. These findings provide a basis for further research on supplementing substrates with amino acids for cultivating mushrooms.
The striped fruit fly (SFF), Zeugodacus scutellata, is an agricultural pest species with a strong and rapid reproductive ability that can cause significant harm. To control the population of these kind of pests, the sterile insect technique (SIT) is being used as one of the effective methods. SIT involves the introduction of sexually transmitted factors that reduce the reproductive capacity of males. This study shows that knocking down the testis-specific serine/threonine protein kinase 1 (Zs-Tssk1) gene alters male fertility and male-initiated types of communication. Since Zs-Tssk1 influences the physiology of the testes, spermatogenesis is also affected, which in turn alters the lifespan of Zs-Tssk1 knock down group in comparison with the control. Based on these results, Zs-Tssk1 may be crucial in reproductive function, and its down-regulation may be helpful in controlling SFF through SIT.
Serratia marcescens catabolic threonine dehydratase는 streptomycin sulfate treatment, Sephadex G-20O gel filtration, AMP- Sepharose 4B affinity chromatography 등의 방법으로 정제하였는데, 최종 단계에서 회수율은 15.5%이었으며 50배 정제되었다. Native 분자량은 native pore gradient polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) 방법으로는 120, 000이었다. SDS- PAGE 에 의한 subunit의 분자량은 30, 000이었고, 즉 S. marcescens 효소는 4개의 동일한 subunit으로 구성된 homo-tetrameric protein임이 판명되었다. S. marcescens 효소의 L-threonine에 대한 Km값은 AMP가 있는 조건에서 7.3 mM, AMP가 없는 조건에서 92 mM이었다. S. marceseens 효소는 효소 l mole 당 각각 2 mole의 Pyridoxal 5`-PhosPhate(PLP), l6개의 free-SH group을 가지고 있었다. S. marcescens 효소는 AMP의 존재 하에서 α-ketobutyrate, pyruvate, glyoxylate, phosphoenol pyruvate(PEP)에 의해 효소 활성이 억제되었으며, cAMP와 ADP에 의해서는 효소 활성이 증가되었다. 효소학적 성질 면에서 S. marcescens 효소는 E. coli 효소보다는 S. typhimurium 효소와 유사하였다. 한편, E. coli 효소는 cAMP에 의하여 효소 활성이 증가되고, S. typhimurium 효소는 ADP에 의해 효소 활성이 증가되는 것과 다르게, S. marcescens 효소는 AMP와 ADP 모두 효소 활성이 증가되었다. 따라서 이상의 연구 결과들은 세 enteric bacteria의 catabolic threonine dehydratase가 서로 작은 차이점이 있다는 것을 반영하며, 이러한 사실을 규명하기 위해서는 향후 보다 심층적인 연구를 수행하여야 할 것으로 사료된다.
랫트에 있어서 상이한 단백질과 threonine 급여수준에 의한 간 TDG의 활성을 조사하였다. 식이 중의 단백질 급여수준과 TDG 활성과의 연계성을 조사하였을 때, 12.-% CP가지는 TDG의 총활성이 단계적으로 상승하고, 더 높은 CP 함량 (18.0% ~ 24.0% CP)에 있어서는 경향적으로 threonine 분해의 쇠퇴가 나타났다. 전반적으로 단백질 함량의 증가에 의해 간 TDG를 통한 threonine의 산화가 증가하지 않았음을 나타내었다. 또한 식이 중의 단백질 및 threonine 급여수준과 TDG 화성과의 연계성을 조사하였을 때, 단계적으로 상승시킨 threonine 급여수준이 (0.28 ~ 0.72% Thr) 12.0% CP에 있어서 단계적으로 TDG 활성을 상승시켰다. 또한 유사한 현상이 18.0% CP에 있어서도 관찰되었으며 약간 더 높은 TDG 활성을 나타내었다.
최소 배지에 여러 아미노산을 첨가하여 배양시킨 Serratia marcescens ATCC 25419 세포 추출물에서 threonine dehydratase의 비활성을 조사한 결과 이소루신은 1∼4mM에서 효소의 비활성을 100∼140% 정도 증가시킨 반면 15∼30mM에서 25∼80% 정도 감소시켰다. 루신은 효소의 비활성을 1∼20mM에서 60%이상 감소시켰다. 한편, 발린은 효소의 비활성을 1∼4mM에서 20% 정도, 8∼10mM에서 10%정도 감소시켰으나 20mM에서 효소의 비활성을 원래대로 회복시켰다. 각 2mM 농도의 이소루신과 발린 그리고 이소루신과 루신은 효소의 비활성을 각각 75, 50%씩 증가시킨 반면 세 아미노산을 각각 2과 10mM씩 동시 첨가했을 경우에는 각각 25, 58%씩 감소시켰다. 글리옥실산은 효소의 비활성을 75%, 이마다졸, 피루브산, α-아미노부티르산 그리고 AMP는 모두 50%씩, 호모세린, α-케토글루타르산, α-케토부티르산 및 IPTG를 첨가했을 경우는 모두 25%씩 감소시켰다. cAMP는 표소의 비활성을 1∼2mM에서 10∼40%정도 감소시킨 반면 10mM에서 80% 증가시켰다. 이러한 결과들로부터 S. marcescens threonine dehydratase는 E. coli K-12 효소와는 다르게 낮은 농도의 이소루신에 의해 효소의 비활성이 증가되고, 높은 농도의 이소루신(10∼30mM)에 의해서는 감소되는 s등 이소루신 생합성 과정에서 조절 역할을 하는 것으로 생각된다.
The Hippo signaling pathway is essential for regulating proliferation, differentiation, and apoptosis in mammalian cells. Hippo signaling pathway exists in most body tissues and organs, where it controls the size of organs and tissues by keeping cell growth in check and promoting cell death as needed. It has been reported that the members of Hippo signaling pathway are highly expressed in mammalian ovaries and uteri. However, the regulatory mechanism of this pathway in the uterus during estrous cycle regulation remains unclear. Serine/Threonine Protein Kinase 4 (STK4, also known as MST1, a homolog of Hippo in Drosophila) is a major factor of Hippo signaling pathway. However STK4 in the mouse uterus has not yet been examined. The purpose of our study was to determine the expression of STK4 during the estrous cycle and regulation by estrogen in the mouse uterus. We found that STK4 was dynamically expressed in uterine endometrium during the estrous cycle. STK4 highly expressed at the estrus, diestrus, and were found to dramatically decrease as it progressed to the proestrus, metestrus stage of uterus during the estrous cycle. Expression of STK4 was dominant in glandular epithelial and luminal epithelial of proestrus, estrus, and diestrus stage, whereas in metestrus stage, expression of gene intensity was faint. Estrogen or estrogen receptor antagonist ICI 182,780 treatment, in ovariectomized mouse uterus, Expression of STK4 and its downstream genes were increased by estrogen. Our results show that the Hippo signaling pathway is estrogen-dependent in the mouse uterus. These informations will give us on sights to understand uterine dynamics during the estrous cycle.