농작물의 수분 매개자이며 생태계 유지에 필수적인 역할을 하는 꿀벌의 노제마병(nosemosis)은 꿀벌 집단 붕괴현상(colony collapse disorder: CCD)의 원인 중 하나로 알려져 있다. 또한, 노제마병은 봉군 약화를 초래할 뿐 아니라 여러 가지 양봉 산물의 생산성을 낮추는 원인이기도 하다. 국내에서는 Nosema ceranae가 노제마병의 주요 병원체로 알려져 있다. 노제마 감염을 확인하기 위해서는 꿀벌의 중장을 적출한 후 노제마 포자의 확인 및 계수를 통해 감염 수준을 평가할 수 있다. 본 연구에서는 더욱 빠르고 정확하게 노제마 감염 수준을 평가할 수 있는 새로운 방법으로 포자 염색법과 qPCR 방법을 개발하였다. 노제마 포자에 대해 특이적인 염색이 가능한 Fluorescent Brightener를 이용하여 노제마 감염 꿀벌 중장을 염색한 결과, 형광 발현으로 노제마의 감염 여부를 확인할 수 있었다. 또한, 중장내 포자량에 비례한 형광 발현도 확인할 수 있었다. 그러나, 노제마 감염에 대한 특이도 및 포자량에 비례한 형광 발현 민감도는 신뢰하기 어려웠다. 그에 비해, 노제마 특이 유전자를 이용한 qPCR 방법은 노제마의 감염 여부 뿐만 아니라 포자량에 비례한 감염 수준 결정이 가능함을 확인하였다. 특히, 많은 시료들에서 노제마 감염 수준의 신속하고 정확한 평가에 qPCR 방법은 유용하게 활용될 수 있을 것으로 기대되었다.
The clearwing moth, Synanthedon bicingulata (Staudinger, 1887), is a pest that infests various species of cherry trees. However, genetic information regarding the genus Synanthedon including S. bicingulata, is limited. In this study, we sequenced a complete mitochondrial genome (mitogenome) of the species. The 16,255 bp of S. bicingulata mitogenome differs from the typical gene arrangement formed in Lepidoptera: trnQ-trnS2-trnM-trnI arrangement between the A+T-rich region and the ND2 junction. Moreover, the genome has untranslated repetitive sequences in the intergenic space between lrRNA and trnV, as well as the CGA start codon in COI and the TTG start codon in ATP8. Similar observations are noted in species belonging to the tribe Synanthedonini within the genus Synanthedon.
The baculovirus expression system (BES) utilize the p10 or polyhedrin promoter, a very late promoter that exhibits strong transcriptional activity primarily at the end of viral infection, to produce useful recombinant proteins. The burst sequence of the very late promoter is essential for strong transcription, and VLF-1 is a transcription factor that binds specifically to the burst sequence, and it has been reported that it can regulate the amount and timing of expression of protein by the very late promoter. Recently, a VLF-1 constitutively expressing cell line was constructed to increase the production of the target protein, but the effect was minimal. In this study, to find the optimal VLF-1 expression conditions to increase target protein production efficiency, we controlled the expression of VLF-1 through various promoters and evaluated the target protein expression efficiency by the p10 promoter accordingly.
Hand, foot, and mouth disease (HFMD) is a highly contagious disease with no specific treatment. Since it is common in immunocompromised children under the age of 5, there is a need to develop a safe vaccine. Virus-like particles (VLPs) are similar structures to viruses with the lack of genetic material which makes them impossible to replicate and infect, and therefore have a high level of biological safety and are considered to have high value as vaccines. In this study, the insect virus expression system that is widely used for vaccine and drug production due to its high post-translational modification efficiency, was used to produce VLPs for Coxsackievirus type A6 and A10, which are recently reported to be the main causes of HFMD. For this purpose, the selection of promoters that can control the timing and intensity of expression of 3CD protein, which is essential for VLPs assembly but has been reported to be cytotoxic, was conducted to construct an optimal expression form for HFMD-VLP.
산오이풀(Sanguisorba hakusanensis)은 한국의 자생식물 이며 정원소재로써 가치가 있지만, 생육 및 생리적 특성 및 정 원 적응 여부에 대하여 알려진 정보가 많지 않아 이용에 어려 움을 겪고 있다. 본 연구에서는 자생식물인 산오이풀의 관수 주기 및 NaCl 농도에 따른 생장, Fv/Fm, NPQ, 성분 변화, 무기성분 변화를 조사하여 내건 및 내염성 보유 여부, 생육 한 계 범위, 스트레스 환경에서 생육을 유지하기 위한 반응을 파 악하고자 했다. 실험 결과 NaCl 무처리구의 관수주기에 따른 성분 분석에서 엽록소 함량의 감소를 제외하고 유의한 차이가 나타나지 않았으나 이는 토양수분함량이 건조 스트레스를 유 발할 정도로 감소하지 않았기 때문으로 보인다. 염 처리에서 는 2주 이후 급격한 스트레스 반응이 나타났고 3주차부터 고 사하기 시작하여 6주차에 모든 개체가 최종 고사했다. 이러한 결과는 2주까지 염 스트레스에 의해 유발되는 2가지 스트레 스 중 초기에 나타나는 삼투 스트레스에는 저항하였으나 이후 나타나는 NPQ의 감소 등 이온 스트레스에 의해 유발된 광합 성 기구 붕괴로 인해 정상적인 생육을 유지할 수 없었기 때문 에 나타난 것으로 보인다. 그러나 무기이온 분석은 이온 스트 레스에 저항하기 위한 메커니즘의 존재 가능성을 시사하였다. 상대적으로 염 농도가 낮을 때에는 세포내 Ca2+ 및 K+ 수준이 높았는데, 이는 Ca2+ 수준이 높아짐에 따라 Na+를 세포 밖으 로 방출시키는 단백질, Na+를 K+와 함께 수송하는 단백질이 기능하여 Na+축적을 지연시키는 반응이 있었음을 시사한다. 그러나 NaCl을 고농도로 처리했을 때는 이러한 반응이 관찰 되지 않았다. 따라서 산오이풀은 염 스트레스에 의해 야기되 는 삼투 스트레스에 강한 저항성을 가지고 있고 이온 독성을 줄이기 위한 메커니즘으로 Na+ 세포내 축적을 지연시키는 것으로 보이지만, 심한 염 스트레스를 받았을 때 나타나는 급격 한 반응에서 이러한 메커니즘이 기능하지 못하고 이온독성에 매우 취약한 것으로 여겨진다. 본 연구를 통해 자생식물인 산 오이풀의 활용을 늘리는 데 기초적인 자료를 제공할 수 있을 것으로 생각된다.
표면발현(surface-display system)은 세포 또는 바이러스 표면에 목적 단백질을 고정하여 발현시킴으로써 목적 단백질에 대하여 독립적인 공간 구조 및 생물학적 활성을 부여하는 단백질 공학 기술이다. 또한 이를 이용하여 높은 중화항체 유도 및 대량생산이 가능한 삼량체의 형태로 항원 단백질의 발현 또한 가능하다. BES(baculovirus expression system)에서의 표면발현 기술은 번역 후 수정과정 및 복잡한 구조의 다양한 단백질의 발현이 가능하기 에 다른 숙주 기반 시스템보다 효율적이라고 보고되고 있다. 그러나 목적 단백질 외의 다른 표면 단백질과 발현 공간에서의 경쟁으로 목적 단백질의 낮은 생산량이 큰 문제점으로 지적되고 있다. 따라서, 이러한 BES에서 표면 발현의 생산 효율을 증대시키기 위하여, 동일한 표면 공간에 대한 단백질 간의 발현 경쟁에 대해 실험적으로 확인 후, 그를 해결하기 위하여 표면발현에 최적인 목적 단백질 발현을 위한 프로모터 선발 실험을 수행하였다. 이를 통해 BES에서 표면발현에 의한 목적 단백질의 생산 효율을 증대시킬 수 있음을 확인하였다.