Elevated expression of survivin is strongly associated with tumorigenesis and even in human common cancers. Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the 7th most frequent cancer in human and responsible for more than 90% of all oral cancer. The purpose of this study is to confirm whether survivin is associated with oral carcinogenesis, expecially has a role in the development of OSCC. For the control group; 3 specimens obtained from normal oral mucosa without any inflammatory reaction were used a nd for the experimental group, specimens obtained f rom 18 sub jects of OSCC; 6 subjects from Well differentiated type OSCC; 4 subjects from Moderately differentiated type OSCC; 3 subjects from Poorly differentiated type OSCC; 3 subjects from Verrucous carcinoma: and 2 subjects from C arcinoma in situ were used. All the specimens were embedded in paraffin, sectioned 5 μm or more in thickness, and stained with hematoxylin- eosin. For immunostain, the specimens were incubated with 1;200 diluted primary antibody (anti-survivin monoclonal, Biocare Inc, USA), followed by the secondary antibody(NovoLink Polymer detection system, Novocastra Lab., UK). The bound antibodies were visualized by addition of diaminobenzidine tetrahydrochloride(DAB) for 30 minutes at room temperature. The specimens were counterstained with Mayerʼs Hematoxylin and mounted. Quantitation of immunoreactivity was performed under the light microscope with the following criteria ; Intensive reaction; +++, Moderate reaction; ++, Minimal reaction; +. Using the image analyzer(Korea Optical System), immunoreactivity of tumor cells in various field was measured and statistically analyzed with SPSS 15.0 Program. The results were as follows: Expression of survivin in OSCC was significantly increased in the nucleus and the cytoplasm of OSCC as compare to those of control group (p<0.05). Expression of survivin in the nucleus and the cytoplasm of the cells in OSCC is correlated with the cellular malignancy (p<0.05). Expression of survivin in Poorly differentiated type OSCC partly correlated to some extent to cellular malignancy (p<0.05). These results suggest that expression of survivin in OSCC is closely associated with to the development, and malignancy of the OSCC, b ut it is not enough to be used a s a marker f or the c ellular malignancy. Further studies are needed to relate the expression of survivin to cellular malignancy.

The purpose of this study was to evaJ uate the role of integrin a 3 and integrin ß 1 expression in the saivary gJand tumors. For this study, 11 specimens diagnosed as pleomorpic adenoma, adenoid cystic carcinoma, adenocarcinoma, mucoe pidermoid carcimoma referred to the Dept. of Oral Pathology‘ School of Dentistry, Kyung Hee University, 2 specimens 01' normaJ submandibular gland tissues were used as experimental, control groups respectively, All the tissues experimental and control group wel'e fixed in neutral formaJin solution and embedded in paraffin, seriaJ tissue section were made 511m in thickness and processed in the standard way for immunohistochemical method, using primary antibody against integrin a 3, and integrin ß 1 each was diluted at 1;100 followed by the poly- horse radish peroxidase detection system with DAB as chormogen counterstained with Mayel ’s hematoxylin stain method and mounted And examined unde1' the biologic micro scope with the criteria of no epitheliaJ stain, weak 01' focal epithelial stain, moderate 01' focal intensive epithelial s tain. intense generalized epithelial staining for the epithelial, and connective tissue components in no1'mal salivary gland, and saivary g land tumors : pleomorphic adenoma‘ adenoid cystic carcinoma, adenoca1'cinoma, mucoepide1'moid ca1'cinoma on each On the integ1'in α 3 reaction, negative to minimal posit ive reaction was noted on the salivary gland twnors and nor mal subma ndibular gland tlssues On the integrin ß 1 reactions, intense 1'eaction is shown on the serous demilune and ductal cells , and partly on the serous acini in submandibula1' gland tlssues On the integrin ß 1 reactions to pleomorphic adenoma tissues, moderate reactions were noted on the ductal celJs and myoepithelial cells. On the integrin ß 1 reactions to adenoid cystic ca rci noma‘ adenocarcinoma, mucoepidermoid ca1'cinoma tissues, intense reactions were shown on the neo plastic cell s , This resuJt suggest that integrin a 3. integrin ß 1 could be a 1'ole inducing the tumorigenesis.

포유동물 생식세포를 생산하는 정자형성과정은 정원줄기세포 (spermatogonial stem cells, SSCs)가 일생 동안 정소 내 기저부에 존재하면서 계속적인 증식을 통해 그 수를 유지하고, 그 중 일부가 감수분열에 진입하여 남성생식세포인 정자를 생산하는 일련의 과정이다. 신생 및 성체의 정원줄기세포는 의학과 접목하여 불임 및 저출산 치료에 크게 기여할 것으로 사료되어, 이미 많은 연구자에 의하여 활발히 연구가 진행되고 있다. 그러나 이중 성체 정소 유래의 정원줄기세포는 신생 정소에 비하여 체세포당 비율이 매우 낮아 이를 분리하여 배양하기 위해서는 효율 높은 정원줄기세포의 분리 방법의 개발이 필요하다. 따라서 본 연구는 인간에 적용하기에 가장 적합하다고 생각되는 조직이식 방법을 통하여 성체 생쥐의 정원줄기세포를 과밀화하고, 이렇게 얻어진 세포를 체외에서 배양하고자 하였다. 6～8주령의 정상적인 정자형성과정이 일어나고 있는 성체 생쥐 (BDF1)의 정소를 분리하였고, 정소 내 존재하는 분화된 생식세포를 줄여주기 위하여 면역이 결핍된 누드마우스의 등쪽에 이식하였다. 이때 생착효율을 알아보기 위하여 실험군은 3개 (whole testis under dorsal skin, slice testis under dorsal skin and whole testis in the abdominal cavity)의 그룹으로 나누어 이식하였다. 이식 2～4주 후 이식한 정소 조직을 채취하여 일부는 기존의 방법 (정소 조직의 이식방법을 사용하지 않은 대조군)과 비교해서 조직이식을 시행 후 세정관내 존재하는 정원줄기세포의 비율을 조직화학적 방법으로 비교 분석하였다. 나머지 조직은 개개의 세포로 분리하여 정원줄기세포의 증식 및 유지에 필요한 성장인자 (GDNF, bFGF, LIF, EGF, IGF-1)를 첨가한 후 배양하였으며, 7～10일마다 계대배양하였다. 배양된 세포는 RT-PCR, AP staining, TUNEL staining, Immunocytochemistry 및 FACS analysis를 통하여 정원줄기세포 특징을 분석하였다. 이식 2주 후 3그룹 내 정원줄기세포가 포함되어 있는 비율은 각각 93% (13/14), 92% (12/13), 57% (4/7)로 나타났으며, 이식된 조직의 seminiferous tubules내에는 분화된 생식세포가 사라지거나 퇴화된 것을 확인하였다. TUNEL assays를 통하여 Whole과 Sliced testis 그룹에서는 7.3±3.3%과 8.3±3.9% 만이 세포사가 진행되는 세포를 관찰한대 반하여 Abdominal cavity에 이식한 군에서는 70.9±16.2%로 매우 높은 세포사율을 관찰하였다. 체외배양 기간 동안 정원줄기세포의 colonization 효율은 이식하지 않은 대조군에 비하여 높게 관찰하였다. 조직 이식 후 배양한 성체 유래 정원줄기세포는 위 성장인자가 포함된 배양액에서 2.5달 (8계대) 동안 성공적으로 유지 배양되었다. 배양된 세포는 정원줄기세포의 특징인 AP activity를 강하게 나타냈으며, 표지인자인 Thy-1와 GFRα-1 또한 강하게 발현되는 것을 FACS와 Immunocytochemistry를 통하여 확인하였다. 또한 RT-PCR를 통하여 정원줄기세포 표지유전자 마커인 integrin β1, mvh, ngn3 mRNA는 강하게 발현되는데 비하여 생식세포 분화유전자 마커인 piwil2, stra8, c-kit, TH2B and TP-1 mRNA는 발현되지 않거나 약하게 발현되었다. 조직이식을 통하여 성체 내 존재하는 극소수의 성체 정원줄기세포의 분리 및 배양이 가능함을 확인하였다. 이러한 생쥐 모델 시스템을 인간에게 적용할 경우 autologous한 조직이식을 통해 단순화된 방법으로 정원줄기세포 분리 및 배양이 가능할 것으로 사료된다.