안전성이 강화된 화장품용 방부제 소재를 개발하기 위하여, 대장균 β-gal을 이용하여 OD 로부터 합성된 OD-gal의 성능을 기존의 OD와 비교하는 연구를 수행하였다. 먼저, mass spectrometry 분석을 통하여 OD-gal의 sodium adduct ion (m/z=331.1731)과 protonated ion (m/z=309.1926)으로 OD-gal 합성을 확인하였다. 새롭게 합성된 OD-gal과 OD의 항균력 비교를 위하여 E. coli, S. aureus, C. albicans, A. niger에 대한 MIC 값을 측정하였다. 그 결과, OD-gal과 OD의 MIC 값 사이에 그렇게 큰 차이를 관찰할 수 없었다. 또한, OD-gal과 OD의 세포독성을 비교하기 위하여, HaCaT 세포에 OD 또는 OD-gal을 처리한 후, 세포 생존율을 EZ-Cytox assay를 이용하여 정량 하였다. 1.5% OD의 경우에는 24 시간에서 세포생존율이 대조군과 비교하여 64%, 48 시간에서는 42%로 나타났고, 1.5% OD-gal을 처리한 세포의 세포생존율은 24 시간에서 유의적인 변화가 없었지만, 48 시간에서는 85%로 나타났다. 결국 OD-gal은 OD와 비교해서 약 40% 이상의 세포독성 감소효과가 있는 것으로 확인되 었다. 이러한 결과로부터 OD에 한 분자의 galactose를 결합시킴으로 인하여 항균력은 어느 정도 유지하 면서 피부 세포에 대한 독성이 감소된 OD-gal의 특성을 확인할 수 있었다. 앞으로 후속 연구를 진행하여 보다 안전한 화장품용 방부제 소재로서 OD-gal의 실용화 기반을 구축할 예정이다.

Previous in vi tro studies demonstrated that H202 or carbamide peroxide cou ld penetrate i nto pul p chambers through enamel and dentin (Benetti et a l., 2004; G okay et a l. , 2004‘ Suli eman et al .. 2005) ‘ Recently. Lee et al.(2006) demonstrated that H20Z enhanced the diffe rentiation of odontoblast like cell line, whereas it inhibited osteogenic diffe rentiation in pre 。steobl astic cell line, as seen by its efl"ecLs on an early difï"erentiation marker. ALP activity. I-lowever. the effects of HZ02 have not been well elucidated in primary cultured human pulp cells ln th is study‘ we investigated whether HO- 1 is involved in H20 2-induced cytotoxicity and examined the production 0 1" dent in sia lophosphoprotein (DSPP) and other minera li zation markers, in human pulp cells H20Z dec1'eased cell viabili ty. but increased HO-l and DSPP expression in a concentra t ion and time dependent manner. Inhibitors of guanylate cyclase, PI3K. ERK, and p38 MAP kinase blocked J-!?,0 2- induced cytot oxicity and the expression of HO-1 and DSPP mRNAs in pulp cells. These data suggest that t he induction of HO-l by H202 in pu lp cells plays a protective role against the cytotoxic effects of H202 and stimulates DSPP expression. resulting in prematu re oclontoblast differentiation th rough pathways t hat involve cGMP. p38. ancl ERK

Al though the changes in tooth morphology and hardness by hydrogen peroxide(H20 z) have been r‘epor‘.ted .‘ the pαr。o야t뻐ec야tive role of heme oxygenase-l(HO-l) against the cytotoxic effects of H202 has not been clarifïed i n human pulp cells ln this st udy. we investigated whether HO-l is involved in Hz0 2-induced cytoLox icity a nd examined the production 0 1' dentin sia lophosphoprotein(DSPP) and other mineralization markers‘ in hllman pu lp cells H202 decreased cell viabi lity, but increased HO-l and DSPP expression in a concentra tion and time dependent manner . Inhibitors of gllanylate cyclase. PI3K, ERK. and p38 MAP kinase blocked H202-indllced cytotoxicity and the expression of HO-l and DSPP mRNAs in pulp cells. These data suggest that the induction of HO-l by H202 in plllp cells plays a protective role against the cytotoxic effects 0 1' HzOz and stimulates DSPP expression‘ reslllting in prematllre odontoblast dilTerentiation throllgh pathways that involve cGMP‘ p38. and ERK.

The aim of this study was to investigate the cytotoxic effect and its mechanism on Radix Aconiti(RA) extract in lung cancer cell lines. RA extract treatment decreased the cell viability in a dose-dependent fashions in lung cancer cells including A549, H460, H23 and H157 cells. Many investigators reported that A549 and H460 cells expressed wild-type p53, but H23 and H157 cells preserved mutated p53. After treatment with RA extract in A549 and H460 cells, we measured the expression of p53 protein levels using Western blot. analysis. In both cells treated with RA extracts, p53 protein expressions were increased in a dose-dependent manner. In our experiments, RA extracts also have cytotoxic effects in H23 and H157, which have mutated p53. Treatment with RA extract decreased bcl-2 protein expressions in both cells. These results suggest that RA extracts have cytotoxic effects via p53 expression increase and bcl-2 inhibitable pathways in A549, H460 cells and H23, H157 cells, respectively.

지하 943 m(3 호공)로부터 취수한 경산 광천수의 유·무기성분을 분석한 결과 총 17종류의 성분 중 무기물은 11종류가 검출 되었으며 무기성분 중에서는 나트륨과 칼슘 성분이 많이 함유되어 있는 것이 특징 이었다. 그리고 구리와 납과 같은 중금속과 탄산가스 및 유화수소 검출되지 않았다. 그리고 항산화 활성, 항돌연변이원성 및 인간 암세포 성장억제 실험 결과 항산화 활성에서는 비교적 약한 활성을 나타내었다. MNNG, 4NQO, Trp-P-1 및 B(α)P와 같은 돌연변이원을 이용한 미생물 수준에서의 항돌연변이원성 실험 결과 S. typehimurium TA98에 대해서 간접변이 원인 Trp-P-1은 시료 농도 200μg/plate 첨가 시 54%의 억제활성을 보였으며 B(α)P 및 Trp-P-1에 대해서도 각각 67%와 63%의 높은 억제활성을 나타내었다. 그리고 광천수의 항암활성을 규명하기 위한 암세포 성장억제 효과에서는 시료농도 50 μg/well 첨가 시 A549, Hela, AGS 및 MCF-7에 대해서 각각 66%, 45.6%, 37.7% 및 47.6%의 억제효과를 나타내었다. 또한 인간 정상 신세포 293에 대한 온천수 농도에 따른 세포독성 효과는 20% 이하는 낮은 생육 억제율을 보였으며 이것은 광천수가 정상세포에 대해서는 비교적 낮은 독성효과를 나타냄을 알 수 있었다.

본 연구는 안과에서 주로 사용되는 생체 염색시약으로 Fluorescein, Rose Bengal, Erythrosin B, Lissanúne Green B 올 인간의 결박세포인 Clone1-5c-4 cell line올 배 양하여 cytotoxicity릎 조사하기 위하여 1%, 0.25% 의 농도보 5분， 15분 동안 처리하 여 MTT assay, SRB assay를 실시하였다. 각 염색사약의 세포독성올 바교 검정한 결과， Rose Bengal과 Lissamine Green B에서 서I 포 증식 저해용이 30% 이상 나타났 고， 회복효과를 보기 위하여 시약 제거 후 1 일 배양하여 Ml‘T. SRB assay를 실시한 결과는 Rose Bengal에서 거의 비슷한 수준이었으나 Lissamine Green B 에서는 더 증 가하였다. 또한 5, 15분 동안 시약처리 직 후 subculture활 실시한 후 세포의 부착과 중식정도를 관찰하였고， 회복효과를 보기 위해 3 잊 후에 세포의 형태를 관찰한 결과， Rose Bengal은 거의 차이 가 없었으나 Fluorescein 에서는 회복효과를 보였다.0.25% trypsin을 처리하여 세포에 영향을 주어 세포의 인위적인 손상올 형태학적으로 비교 한 염색상 세포 저해 정도는 Rose Bengal 이 가장 높-았고， Fluorescein 이 제일 낮았 다. 이러한 결과로 볼 때 일부 생체 염색시약이 인간의 결막세포인 Clone1•5c -4 세 포증식을 저해하는 것으로 사료된다.

Background : As a part of ongoing research to elucidate and characterize anti-cancer nutraceuticals, extracts from many kinds of medicinal plants were tested for their ability to cytotoxicity on cancer cells so far. Datura stramonium is one of the plants known to contain various alkaloids such as hyoscyamine, scopolamine, atropine etc. Traditionally, it has been used as an analgesic, antispasmodic, and central nervous stimulant. Leaves are also known to be effective against asthma, cough, and chronic bronchitis. In this study, cytotoxicity of extracts from D. stramonium on human cancer cell lines A549 (lung), and HepG2 (liver) were evaluated and compared. Methods and Results : The extract was diluted with DMSO in the form of 10, 50, 250, 1,000 μg/ml for final concentration series respectively. The cell viabilities were examined by MTT assay. On HepG2 cell line, extracts of D. stramonium showed dramatic dose-dependent cytotoxicity on 10, 50, 250, 1,000 ㎍/㎖ concentrations series as 88.16%, 78.55%, 55.57%, 23.06% cell viability respectively. On A549 cell line, likewise, same concentration series showed a dose-dependent cytotoxic effect as 96.49%, 96.12%, 68.54%, 20.26% cell viability respectively. On A549 cell line, there was no difference in effect between 10 ㎍/㎖ and 50 ㎍/㎖. Conclusion : Above results, high concentrations of extracts are effective on two cancer cell lines. These results are expected to be used on further studies about the anticancer activity of D. stramonium as basic data. In order to confirm the anticancer effect of D. stramonium, it is anticipated that additional tests will be required to confirm the apoptosis assay and related protein expression.

화장품에 방부제(살균/보존제)로 사용되는 1, 2-hexanediol (HD)로 인한 부작용을 극복하기 위하여, Escherichia coli (E. coli)의 β-galactosidase (β-gal)를 이용하여 transgalactosylation 반응으로 1, 2-hexanediol galactoside (HD-Gal)를 합성하였다. 본 연구에서는 합성된 HD-Gal의 인간 피부세포에 대한 독성이 어느 정도인지를 HD와 비교하여 관찰하였다. HD-Gal과 HD의 세포독성은 인간 피부각질형성세포 (HaCaT cell line)에 HD와 HD-Gal을 처리한 후, cell proliferation assay를 이용하여 비교 분석하였다. 또한 이때, 위상차 현미경으로 HD-Gal과 HD로 처리한 세포의 상태를 비교 관찰하였다. 그 결과, HD-Gal은 42.2 mM에서 211 mM의 농도 범위에서 세포독성이 관찰되지 않았으며, 현미경 관찰에서도 큰 변화를 관찰할 수 없었다. 그러나, HD의 경우에는 저농도에서(42.2 mM and 84.4 mM)는 세포독성이 관찰되지 않았으나, 고농도 (168.8 and 211 mM)에서 매우 높은 세포독성을 나타내었고, 현미경 관찰에서는 고농도에서는 물론이고, 세포 독성이 관찰되지 않은 HD의 저농도에서도 세포모양과 세포 수에서의 변화가 관찰되었다. 앞으로 세포독성이 감소된 HD-Gal이 HD의 대체제로서 안전, 건강 및 웰빙 개념의 새로운 용도로 개발될 수 있을 것으로 생각된다.

Background : This study was carried out to investigate the cytotoxicity in 9 extracts from 8 medicinal plants, such as leaf extract of Lonicera maackii (Llm), leaf extract of Platycarya strobilacea (Lps), flower extract of Fagopyrum dibortryis (Fdf), stem extract of Physostegia virginiana (Spv), root extract of Allium senescence (Ras), aerial part extract of Allium schoenoprasum (Aas), aerial part extract of Artemisia japonica var. manshurica (Aaj), stem extract of Caryopteris incana (Sci), and leaf extract of Caryopteris incana (Lci), on human cancer cell lines. Methods and Results : Dried plant extracts were granted from National Institute of Horticultural and Herbal Sciences. The extracts of each plant were dissolved in DMSO and stored in deep freeze at –20℃. The cell viabilities were examined by MTT assay. On SK-OV-3 cell line, Lps, Aas, Sci ans Lci showed dose-dependent cytotoxic effect. On A549 cell line, almost samples show dose-dependent cytotoxic effect, but especially Aaj showed relatively high cytotoxic effect. In case of HCT-15 cell line, Llm and Aas showed relatively high cytotoxic effect. Conclusion : These results suggested that Lonicera maackii, Platycarya strobilacea, Fagopyrum dibortryis, Physostegia virginiana, Allium senescence, Allium schoenoprasum, Artemisia japonica var. manshurica, and Caryopteris incana can be utilized as potential sources of anticancer agent due to their cytotoxicity.

생리활성에 따른 용매분획을 통해 으름(Akebia quinata) 과피로부터 4종의 사포닌을 분리하였다. 으름 과피를 에탄올로 추출한 후 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물 층으로 순차분획하였으며 분광학적 분석을 통해 부탄올 분획으로부터3-O--L-arabinopyranosyl hederagenin (-hederin), 3-O--L-rhamnopyranosyl (12) -L-arabinopyranoly oleanolic acid (-h

Some studies of dandelion have been carried out on bioactivities, however, no comparative analysis on antioxidant and cytotoxic activities in the Korean dandelion (T. coreanum NAKAI.; KD) and dandelion (T. officinale WEB.) have been reported. In this study, the extracts of KD and dandelion analyzed relative phenolic contents and free radical scavenging, antioxidant enzyme and cytotoxic activities. The extract of Korean dandelion leaves (KDL) exhibited a higher phenolics content (368±11.5 mg/l00 g) and a strong free radical scavenging activity (RC50value;87.89 ug/ml) than other parts and BHT (120.12 ug/ml), synthetic antioxidant. At ascorbate peroxidase (APX) activity, the dandelion root (DR) had a greater (38.8 U/mg protein) antioxidant enzyme compare to the dandelion leaves (12.2 U/mg protein). The catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) followed higher enzyme activity in Korean dandelion root (KDR) than other parts. In a cytotoxic activity against human cancer cell, the extracts of KDR was found to be active against Calu-6, HCT-116, and SNU-601 cell lines, with IC50 values of 522.34, 532.74 and 614.85 ug/ml, respectively. These results suggest that KD and dandelion would be an alternative antioxidant source, based on natural plant resources.

살구 에탄올 추출물의 항산화 활성은 RC50값이 살구씨와 살구과육 에탄을 추출물의 경우 각각 과 으로서 강한 항산화 활성을 나타내었다. 살구 에탄을 추출물의 항돌연변이 효과의 검토는 Salmonella typhimurium의 변이주인 TA98과 TA100을 이용한 Ames test로 확인하였다. 그 결과 살구씨 및 과육 에탄올 추출물 자체의 돌연변이원성은 없었고 직접변이원인 MNNG에 대해 시료농도 에서 살구씨와 살구과육 에탄올 추출물 각각에서

신나무(Acer ginnala Max.) 껍질의 메탄올 추출물 및 분획물들의 Ames test를 이용한 항돌연변이원성 및 SRB assay에 의한 세포독성 효과를 규명하였다. 시료자체는 돌연변이원성이 없는 것으로 나타났다. MNNG ()에 대한 항돌연변이 효과에서 S. typhimurium TA100 균주에 대해 신나무 껍질 메탄올 추출물에서 시료농도 첨가시 로 가장 높게 나타났다. 동일시료 농도에서 4NQO에 대하여서는 S. typhimuri

산마늘 에탄올 추출물과 각종 유기용매 분획물에 대하여 항돌연변이원성과 세포독성을 검토하였다. 시료자체는 돌연변이원성이 없는 것으로 나타났다. 직접 변이원인 MNNG에 대한 항돌연변이 효과에서 S. typhimurium TA100 균주에 대해 산마늘 에탄올 추출물(200/plate)에서 88.2%의 억제효과를 나타내었다. 동일 시료 농도에서 4NQO에 대해서는 S. typhimurim TA98과 TA100 두 균주 모두에서 각각 76.4%와 83.

발효콩을 주원료로 한 기능성 식품의 에탄올 추출물과 분획물에 대한 항산화 활성을 측정한 결과, 에틸아세테이트 분획물에서 31.6/mL의 강한 항산화 활성을 나타내었다. 직접 변이원인 MNNG에 대한 항돌연변이 효과에서 S. typhimurium TA100 균주에 대해 발효 콩을 주원료로 한 기능성 식품의 에탄올 추출물(200 /plate)에서 84.8%의 억제효과를 나타내었다. Trp-P-1에 대해서는 S. typhimurium TA98과 TA

본 실험은 돌연변이원성 억제작용을 검토하기 위하여 Ames test에서 양성반응을 나타내며, 물질 그 자체로서 돌연변이를 유발하는 직접 변이원물질로 MNNG와 4NQO 그리고 대사활성을 필요로 하는 간접 변이원 물질인 B(a)P를 사용하여 각각의 농도에 따른 돌연변이원성 억제효과를 검토하였다. 그 결과 직접 변이원으로 사용된 MNNG(0.4μg/plate)의 경우 S. typhimurium TA100 균주에서 시료농도 100μg/plate에서 메탄올 추출물이 89.3%로 가장 높은 억제효과가 나타났다. 또한, 핵산, 부탄올 분획물에서도 각각 75.53, 72.68%로 높은 억제효과를 보였다. 4NQO(0.15μg/plate)에 대한 S. typhimurium TA98 균주에서 시료농도 100μg/plate에서 메탄올 추출물이 79.29%로 가장 높은 억제효과를 나타냈으며, TA100 균주의 경우에서는 핵산 분획물에서 79.49%로 가장 높은 억제효과를 나타내었다. 또한, B(a)P(10μg/plate)에서는 TA98, TA100 두 균주에서 모두, 75μg/plate의 시료농도에서 메탄올 추출물이 75.38, 68.85%로 가장 높은 억제효과를 보였다. 암세포주(A549, Hep3B, MCF-7)에 대한 음나무 내피 추출물의 세포독성을 알아보기 위하여 실험한 결과 폐암세포주인 A549에서는 핵산 분획물(1000μg/ml)이 81.54%로 가장 높은 억제효과를 나타내었으며, 간암 세포주인 Hep3B에서도 핵산 분획물(1000μg/ml)이 78.57%로 가장 높은 억제효과를 나타냈다. 유방암 세포주인 MCF-7에서도 핵산 분획물(1000μg/ml)이 81.92%로 가장 높은 억제효과를 보였으며, 에칠아세테이트 분획물에서도 우수한 성장 저해효과를 나타냈다. 정상 간세포주인 293에 대한 시료농도에 따른 세포독성 효과를 보면 1000μg/ml 시료 첨가시 암세포주에 대하여 대부분 50% 이상의 억제율을 보이는데 반해 293세포에 대해서는 25% 이하의 성장 저해효과를 보였다. 이는 암세포주에 대한 높은 억제효과에 비해 정상 세포주에 대해서는 비교적 낮은 독성효과를 나타냄을 알 수 있었다.

기내 배양 과정에서 식물성장조절물질의 처리 없이도 성장속도가 매우 빠르고, 모식물체와 동일한 성분의 대사물질을 생합성하는 화학적 전형성능을 나타내는 형질전환된 뿌리 즉, 모상근을 이용하여 약리물질을 생산하고자 대황 모상근을 유도하고 이로부터 추출한 물질의 세포독성을 조사하였다. 1. 수층과 클로로포름 층으로부터 얻은 대황 모상근 추출물 모두 농도의 증가에 따라 세포에 미치는 독성이 증가하였다. 2. 클로로포름층으로부터 얻은 대황 모상근 추출물이 수층으로부터 얻은 대황 추출물보다 세포에 미치는 독성이 크게 나타났다. 클로로포름층 분획의 MTT50, NR50 SRB50은 각각 289.3μg/ml, 302.7μg/ml, 433.8μg/ml이었고, 수층 분획물의 MTT50, NR50 SRB50은 각각 475.8μg/ml, 428.3μg/ml, 549.5μg/ml 이었다. 3. 세포독성 측정방법에 따라 차이를 보였으며 수층 분획의 경우 NR정량법에서 클로로포름층 분획의 경우 MTT정량법에서 독성 정도가 더 높게 나타났다.