A nineteen years old male patient showed a cystic lesion in left maxillary canine to premolar area (#23-#25). This lesion was asymptomatic, and found during his routine radiological check in local clinic. In the radiological observation the cystic lesion showed round radiolucent image containing many calcified bodies which were usually small but irregular in shape, expanding tumorously and resulted in the displacement of canine and second premolar in the absence of first premolar. The lesion was surgically enucleated, and a cystic fibrous tissue containing abnormal teeth was removed and examined pathologically. With the histological observation of tumorous odontogenic epithelium including many ghost cells, which were closely associated with abortive teeth, the lesion was finally diagnosed as CCOT associated with complex odontoma. The ghost cells of CCOT was strongly positive for β-catenin, GADD45, and LC3, and slightly positive for MMP-9, while they were rarely positive for BCL2, Wnt1, HSP-70, and p38. Therefore, it was presumed that the ghost cells of CCOT might undergo dormant cell state through altered cytodifferentiation stimulated by severe growth arrest, DNA damage signaling, and abundant autophage formation.

The overexpression of Phosphoprotein Enriched in Astrocytes (PEA15) gene is commonly found in human diabetic patients. The overexpression of this gene in skeletal muscle and fat tissues have been reported to cause insulin resistance, thereby impairing insulin stimulated glucose uptake. We introduced a gene of mouse PEA15 (mPEA15) and enhanced green fluorescent protein (EGFP) into fertilized one cell pig zygotes using microinjection, and produced a piglet that showed overexpression of mPEA15 in the muscle tissues and expression of EGFP in the ear tissues and hooves. RT-PCR RFLP, southern blot and FISH analysis showed that the tissues carried the transgene. Real-time RT-PCR and western blots demonstrated that PEA15 gene was overexpressed in the various tissues and muscle tissues, respectively. These facts suggest that expression vector system is normally expressed in the trnasgenic (TG) pigs. To use as animal diseases model for type 2 diabetes, further study is necessary to confirm whether diabetes occur in these TG pigs, especially insulin resistance.

The human embryonic-lethal abnormal vision-like protein, HuR, stabilizes mRNA containing adenine- and uridine- rich elements in their 3’untranslated region. Because cyclooxygenase-2 (COX-2) mRNA is a cellular transcript that contains an adenine- and uridine-rich element, it can be regulated by the HuR protein. In this study, we examined the relationship between COX-2, HuR, MVD, and the clinicopathological parameters. Nineteen out of 43 cases of HNSCC showed high level of COX-2expression, and 68% of these patients showed high COX-2 immuno-reactivity indicating the strong expression of the cytoplasmic HuR protein. Also, MVD expression in the cases with high COX-2 expression was higher than in the cases with low COX-2 expression. These results suggest a strong correlation between the overexpression of cytoplasmic HuR and COX-2 expression in HNSCC, and that COX-2 is associated with MVD in HNSCC. In conclusion, COX-2 regulated by cytoplasmic HuR may be a good tumor angiogenic factor in HNSCC.

저온 스트레스에 대한 내성을 지닌 신품종 톨 페스큐를 개발할 목적으로 CaMV35S 프로모터 하류에 NDP kinase 2 유전자가 항상적으로 발현하도록 제작한 벡터를 Agrobacterium법을 이용하여 톨 페스큐에 도입하였다. Hygromycin이 첨가된 선발배지에서 내성을 나타내며 재분화된 형질전환 식물체를 pot로 이식하여 기내순화 시킨 후, Southern blot 분석을 실시하여 본 결과, NDP kinase 2 유전자가 형질전환 식물체의 g

본 연구는 사람 H-transferase가 과발현하는 돼지 체세포주를 개발하는데 있다. 돼지 세포에 사람 H-transferase 유전자를 발현시키는 것은 이종간 장기 이식에 있어서 초급성 거부 반응을 방지하기 위한 한 가지 방법이다. 본 연구에서는 과발현 벡터를 구축하기 위하여 사람 H-transferase을 HepG2 세포로부터 동정하였으며, 이 유전자를 CMV promoter를 이용하여 발현할 수 있도록 포유동물 발현 벡터인 pRc/CMV 벡터에 삽입하였다. 또한, 돼지 산자의 귀 세포를 이용하여 체세포를 수립한 후 jetPEI DNA transfection reagent를 이용하여 벡터를 도입하였고, 300 μg/ml의 G418로 12일간 선별하였다. PCR을 이용하여 선별된 colony들을 분석한 결과, 벡터가 도입되었음을 확인하였고, RT-PCR을 이용하여 사람 H-transferase mRNA가 발현하는 것을 확인하였다. 본 연구에서 확립된 세포주는 사람 H-transferase가 과발현하는 형질 전환 돼지의 생산에 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

방선균은 토양 속에 다양하게 존재하는 미생물의 일종으로 그람 양성 진정세균으로 이차 대사산물을 생산하는 시기와 포자 착생이 시작되는 세포분화의 시기가 밀접한 관련이 있다. S. griseus는 streptomycin을 비롯한 다양한 종류의 endopeptidase 및 exopeptidase들을 생산한다. 방선균에서의 protease 생산은 많은 경우에 이차대사산물이 형성되거나 형태분화가 유도되는 시기에 동시에 시작된다는 점에서 protease가 이차대사물질 생산 및 세포분화에 일정한 기능을 수행할 것이라는 점을 시사하고 있다. 본 연구에서는 S. griseus IFO 13350에서 클로닝한 SGPE protease가 각 strain에서 형태학적으로나 생리적으로 어떠한 gene dosage 효과를 미치는지 조사하는 것이었다. sprD 유전자가 S. lividans를 숙주로 사용한 시스템에서 대량발현이 성공적으로 되는 것을 확인한 후, 본 유전자를 클로닝한 S. griseus IFOI3350 균주와 이의 A-factor 결손주인 S. griseus HHI에 형질전환하였다. S. griseus HHI과 S. griseus IFO13350 에서는 protease activity가 벡터만 도입된 대조군과 sprD 유전자가 들어간 형질전환체에서 큰 차이를 보이지 않았다. 또한 S. griseus IFO13350 및 HHI 모두에서 생리학적·형태학적 분화의 차이를 발견하지 못하였다. Chymotrypsin 계열의 protease를 암호화하는 유전자만이 S.griseus에서 발현이 repression 된다는 사실을 본 연구 결과를 통하여 알게 되었다. 이를 바탕으로 sprD 유전자와 동일계열의 chymotrypsin 계열의 유전자들이 공통적으로 S. griseus 에서 repression되는 일반적인 기전이 있을 것으로 판단, chymotrypsin 계열 유전자들의 promoter 부분의 염기 상동성을 조사하였다. 번역개시부위 바로 상부 유전자부터 상동성을 조사한 결과 적어도 상당부분의 염기배열이 잘 보존되는 지역이 존재함을 알게 되었다. 향후 이들 발현 기구의 조절기구를 연구함으로서 protease의 기능을 밝히는데 좋은 단서를 제공할 것으로 판단된다.

In the 5'-flanking region of the D-AAT, AspAT and AlaDH gene, I found three or two pairs of sequences(designated as P1, P2, P3) which show significant similarity to the E.coli consensus sequences of -35 and -10 for promoters. The spacing between -35 and -10 is 16 to 18bp in all the three putative promoters Pl, P2 and P3 which is in good agreement with the preferred spacer length in E.coli and in B.subtilis. Therefore, the putative promoters may also function to increase the efficiency of transcriptional initiation. The most stable, double-helical $quot;Shine-Dalgarno$quot; pairing is formed with a free energy change(△G) of -13.0 ㎉/㏖, -9.6 ㎉/㏖, -15.8 ㎉/㏖.