Cultured normal human oral kera tinocyte(NHOK) & inunortalized human oral keratinocyte(IHOK) provide a valuable model in ce llular proliferation and differentiation after proper stimulation , And it is interesting to study these estab lished cell lines esca ping normal control on their growth and differentiation, SPRR1 is induced during t erminal differ entiation 0 1' human epiderma l kerat inocytes but is rarely in anaplastic cells of keratinocyte origin, But SPR1 expression has not yet been explained during differ entiation uf NHOK and Lransformed oral keraLinocyLes , The purpose of this study were to examine mHNA and protein expression of SPR1 in response to a known differentiation signal, calcium conc in NHOK, lHOK a nd oral SCC ce ll line(HN 4) , and to apply these results for investigating the molecular mecha nisms of tra nsformed cellular differentiation , Primary cultured NHOK, established IHOK and HN 4 cell line were cul tured in KBM bullet kit Preconfluency of NHOK as control group was used Under O, 15mM Ca++ conc(Precon, Postcon) , and 1, 2mM Ca++ conc(Pos tcon)‘ the insoluble final pellets were measured fo1' cornified cell envelope measurements, and RT- PCR for SPRR1 mRNA meas urement, and immunoblotting for SPRR1 protein measurements in tripli cate , resp ectively , The terminal different ia tion of cu ltured NHOK and IHOK was depend on calcium concentration, while HN4 cell line was not SPRR1 mRNA and protein expression of cultured NHOK showed the highest among cultured IHOK & HN 4 cell line in hi gher ca lcium condition , SPRR1 mRNA and protein expression of cultured IHOK showed higher‘ than tha t of HN 4 cell line in hjgher cacium condi tion , SPRH1 was expressed in differentiation of NHOK and IHOK t ransfected by E6/E7 genes but ra rely expressed in malignant oral keratinocytes , It suggested that SPRR1 ex pression as kera tinocyte terminal diff‘erent ia tion marker involved in cellular cornification would be differentially effected by immorta li zation and ca rcinogenic transforma tion

Epitheli a l mesenchymal interaction(EMl) is well known to be essential in eznbryonic deve]opment. wound hea]jng a nd ca rci nogenes is. Th is study was a i med to design in vi tro model for the investigation of protein analysis in epithe li al a ncl mesenchyma l i nteract ion(EMI) . This stucly usecl oral squamous cell carcinoma cell line(YD-lOB) . 1'0 investigate the clifference 0 1' protei n ex press ion of cancel‘ cells influencecl by variable in vitro conditions. three different models were des ig necl ; Collagen gel- basecl ca ncer cell culture model devoid of fibroblasts(C) , Direct coτulture moclel(M2) composed of ca ncer cells beneath co ll agen gel embeclded with Swiss 31'3 fibroblasts ‘ and Indi rect co-culture model(Ml) with collagen layer betwecn cancel‘ cells and collagen gel with f lbroblasts Two-dimensional electrophoresis was performed to compa re t he diffe r ence of protein express ion pattern of ca ncer cells aznong three znodel systems. Protein identification was done by MALDI-TOF. As res ults ‘ pl'O te in express ion pat tem of cancel' cells was quite different between znonolayer cul ture and coll agen gel based cultu re. Aclditiona ll y. protein expression was different between culture models with fi broblasts and without fibroblasts a ncl between ind irect contact and direct contact of two cell types ‘ Among differentia l prot ei n spots. catheps in D WäS iuenLifï ed by MALDl• TOF Cathepsin D exprcssion was increased from C model to 11띠 and M2 model by West em blott ing. suggest ing that cathe psi n D expression may be activated by direct and indirect stimulation of stromal fï broblas ts F' rom these resul ts ‘ these models could be appropriate for EMI study and cathepsin D mi ght be incluced by fi broblasts s timulation

체외 배양 과정 중에 나타나는 생쥐 초기 2-세포 배의 "in vitro 2-cell block" 현상은 세포내 농도 변화와 밀접한 관련이 있다. 다양한 종류의 세포에서 acetylcholine은 세포막에 존재하는 muscarnic acetylcholine receptor를 통해 세포내 농도 증가를 유도한다. 본 실험에서는 생쥐 "in vitro 2-cell block" 현상에 있어서 ACh의 영향을 알아보기 위해 세포 내 농도 조절 물질을 처리한 후,

본 연구는 topoisomerase inhibitors가 배양 각막 상피세포에서 세포고사를 유도하 는지를 조사기 위해 시행하였다. Topoisomerase inhibitors'{l camptothecin과 etoposide 를 제조사의 추천농도로 1-2 일 동안 배양하여 MTT assay를 이용하여 세포독성을 검 정하여 농도틀 정하고 세포고사를 확인하였다 세포고사의 형태적인 특징은 Hoechst 33342 staining, Annexin V - FITC/PI staining, DePsipher assay and CytoDEA TH staining을 이용하여 확인하였고 DNA fragmentation은 TUNEL파 agarose gel 전기 영동으로 확인하였다. Camptothecin 과 etoposide는 농도 의존성으로 세포고사룹 유또 하였는데 각막상피세포에서는 저l 조사의 추천농도보다 낮은 농도에서 세포고사플 유 도하여 다른 세포보다 민감한 것으로 나타났다- 이러한 결파로 볼 때 topOlsomerase l띠1ibitor는 각막상피세포에서 홀륭한 양성 대조군으로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

We have invented mobile HEPA filter unit of hemopoietic stem cell transplantation clean room (class 100), which is a capsule type to protect the patient from being infected by harmful Aspergillus spore. This equipment is based on the basic structure of US Federal Standard 209D, biological clean room standard of NASA NHB 5340-2 and measurement standard of Japanese JACA No. 24-1989. Performance of HEPA filter was evaluated by dioctyl phthalate (DOP) test method, resulting in 99.97% efficiency for 0.3 ㎛ particles. HEPA filter unit used only 98 W electricity with 24 V storage cell for the patient's treatment for over three hours. When the wind speed was 0.2 to 0.3 m/sec as in bone marrow transplantation clean room, the air flow was constant laminar vertical type. When the amount of dust was measured in the hospital, the equipment maintained the grade of clean class 100 and microbe was not detected. The noise level was less than 52 dB(A). The amounts of microbe inside and outside the building were almost same. The amount was even more in cancer sick room, serious case room and X-rays room than in the general rooms. Also, elevators and stair room were found to transport dust to other areas. Even though the patient with low immunity can be protected from Aspergillus spore by a HEPA filter unit, the system preventing microbe system such as BMT clean room should be placed in rooms such as PET, CT, MRI, and radiation room so that the patients can be protected from having infected by the extremely harmful Aspergillus spore.

본 연구는 SPARC(osteo n ect in) 이 석회화 물질의 형성에 밀접한 연관을 가진다는 짐 애 착안하여 골조직 재생 괴정 중의 기질-세포 상호자용에 있어 SPARC의 역할 석회화 조직 형성과 연관된 SPARC의 발현조절과 기능을 규명하고자 시행되었다 l꾀서 태자 두개관 배양세포로부터 SPARC cDNA를 합성하였으며 이를 이용하여 백서 SPARC 단백질을 합성하였다 SP때C 단맥 질을 이용해 백서 조골 세 포의 증식 에 미치는 영호노을 관찰하였다 동시 에 백서 장골에 인위적인 골결손을 형성하고 형성과정에서의 골기질 관련인자의 분포를 관찰하고 SPARC 의 분포를 in situ hyb ridiz a tion법을 이용하여 관찰하였다 백서에서 분리 합성된 cDNA 조각은 1231bp 크기 였으며 40kD 크기의 단백질을 발현하였다 백서 태자 두개관 세 포의 증식에서 SPARC과 콜라겐 으로 처리된 표띤은 콜리겐 단독으로 표면처 리된 t111 양표연보다 증가힌 세포증식과 단백질 합성 콜라겐 합성을 나티내 었다 백서 -?I-골이1 형성힌 골조직 지| 생괴정에서 SPARC을 투여힌 백서 ;<J-골의 경우 결손부 전체에 걸쳐 증가한 SPARC의 합성을 보였디 SPARC이 투여된 군에서는 질손부의 중심 에서부터 SPARC과 콜라겐의 합성이 증기한 양상을 나타내었으며 대조군과 뚜렷한 차이를 나타내었다 in siLu h yb ricli za Li o n 깨 을 이용한 관칠 에서 골결손부 중잉에 있는 세 포에서의 SPARC 발현이 증가하였으며 그 싱패는 1 4 일 까지 대 조군에 비해 높게 니티났디 이싱의 연구 에서 얻은 결론은 디음과 같다 SPARC은 콜라겐과 결합하여 백서태자 두개관세 포의 배양에서 세 포증식 및 단백질 한성 ‘ 콜라겐 합성 의 뚜렷한 증가를 나타내었으며 . 이 같은 OJ상은 SPARC 단독으로 표연 처리하였을 때 는 관찰되지 않았다. SPARC의 골절손부 투여는 골조직 의 재생을 촉진허며 초기 세 포외 기질의 합성을 증가시켰으며 특히 SP뻐C의 형성이 초기애 증가하는 앙싱 융 나타내었다 이상 의 결과로 볼 떼 SPARC의 투여는 골조직 손상회복 시 초기 골기질 형성과 석회화에 영향을 미치며 SPARC 자치1 의 형성 증가에도 영향 을 미치는것으로보인다

구강암의 발생원인 중 하나인 인간유두종바이 러스(HPV)로 불멸화시 킨 구깅 각화세 포(1 HOK) 외 정상 인긴 구강각화세 포 (NHOK) 의 표지자를 비 교 연구하는 것은 정상과 그 전암냉소의 생화학적 및 세 포회 학적 띤호l을 평가히는 적젤힌 모탤이지띤 떤 구된바 많지 않았다 본 연구는 구강 각화 세 포의 형 질전환을 조절히는 분자적 상태를 연구하기 위 해 익 6000711 의 유전자가 pri nt된 cONA mì croarray를 이용하여 인간 정상 구강각화세 포(NHOK) 와 HPV16으로 불띨회한 각화세 포(J HO K) 간에 유전지 발현을 비교하였다， NHOK외 IHOK세포는 96%의 유전자가 유사한 발현을 보였으며 2배이 상의 발현을 보이 는 경우-는 NHOK가 IHOK에 비해 85개 유전지가‘ IHOK가 쩌OK에 비해 1477H 의 유전자 발현이 u p-regul at i on되 어 총 4%미 만이 발현차이를 보 였고 반복된 hybridì zation 으로부터 얻은 선택된 spot의 Pearson 싱관계수는 074 에서 091로 냐티 났다 NHOK외 IHOK간의 유전자 발현을 기능별로 분석한 결과 몇 가지 주요 발현 유전자 그룹을 확인하였는데 세포부착 및 인식 세포주기 초칠인지 세 포자떨사， 전사인지- 성장인자 및 수용기 ， 세포골격 및 세 포외기질 단백 . 신호진달 조절자 및 기 타 그룹으로 분류할 수 있었다 IHOK에서 는 세 포인식 인자 중 endothelin 1, collagen IV, fibronectin , SPR1 이 발현증가 되었고 CK7, POG1"2, F'G1"1"R2가 세 포골격 및 성장인지중에서 upregulation 되었지만 신호전달 인지중 발현증가된 것은 없었고 동일힌 유전자를 나타내 는 cJ ustered gene map을 그릴 수 있었다 따라서 이러힌 Illicroan‘ay를 이 용한 분자학적 표지자 얀구가 구강 임 빌임과정 에서 유전지발현 을 확인히는데 큰 도웅을 줄 수 있을 뿐 아니라 유전자 조절에 의힌 진단 에 후. 치 료의 정획성을 개선시 킬 수 있으리리 여겨진다

Phosphatase and tens in homologue(PTEN) 은 phosphatidylinosi t이 3'-kinase에 대해서 빈대로 작용함으로써 세 포픽 애 있는 지질 잔류인 phosphatidyl i nosi tol (3 - 5) - tri - phophate(PIP-3) 를 탈인산화시켜서 세포증삭의 자극에 대 한 막수용체의 반응을 조절하는 종앙억 제유전자이다 CpG islan ds의 promoter 메틸화가 세 포주기 의 조젤 이나 DNA 복구외 관런된 유진자 기 능을 소실시키는 것으로 알려지고 있으며. 두경부 편평세포암종에서 p16INK4a, p14ARF, p15‘ D뻐-K， E-Cadhe rin‘ GST-P. hMLH1의 메틸화가 보고되어 있다 두경부 편평세포암종에서 10번 염색체의 소실 이나 장완의 번이기 관칠되었으며. 이러한 유전적 변이의 배경에 PTEN 유전자가 있다 본 연구는 두경부 편평세포암종에서의 PTEN의 떼틸회 빈도와 단백발한 을 알아보고자 하였다 Methylation-specific PCR(MSP) 로 파라핀 포매조직 ( 양성 싱피증식성 병 소 25 이l. 두경부 편평 세 포암 종 44 예) 과 동결절편조직(두경부 떤평 세포암종 4 예)에 대해 PTEN의 메틸화 빈도를 확인하였다 양성 상피 증식 성 벙 소 20 예. 두경부 편평세포암종 40예의 파라핀 포매조직을 이용하여 PTEN 단클론항체인 6H21을 이용하여 변역 조직화학 엽색을 시행 하였다 염색강도와 염색된 부위의 백분율을 곱하여 반정량적으로 점수화하였으며 조직학적 동급 벙기외 임상적 변수애 따 라 분류하여 연역염색의 정수를 비교하였다 양성 상피증식성 병소 25 예 중 13예에서 메틸화되지 않은 PTEN을 보였으니 nl1 틸 화된 예는 없었다 두경부 편평세포암종의 경우 파라핀 포매조직 44예 중 22 예에서 매 틸화되지 않은 PTEN 을 보였으니 때 틸화된 예는 없었으며 4예의 동결절편조직 중 한 예에서 PTEN promoter부위의 베 틸화를 보였다 양성 상피 증식 성 병소와 두경부 편평세포암종의 면역조직화학 염색 평균점수는 각각 69 1과 705 였다 편평세포암종의 경우 임싱 적 벙기 를 1기와 271 를 하나의 군(12 예. 평균점수 852) 으로 3기와 471 를 다른 군 (15예‘ 41 ， 9) 으로 분류하여 비 교하았을 때 통제학적으로 유의한 차이 를 보였다(P=0 .017) 편평세포암종의 조직학적 분화도에 따라 고분화암종(15 예 87 ， 0) 과 중둥도분회 및 저분화암종 (22 예. 61 . 6) 으로 분류하였을 때 분화가 좋지 않을 수록 평균점수가 감소하는 경향을 보였으나 통계혁적으로 유의힌 차이 를 보이지 않았다(P=O ， 361)‘ 환자의 나이와 성별에 따른 차이는 없었다 본 연구결과， PTEN 단백 발현은 두경부 떤평 세 포임 종의 생 불 학적 행태 및 조직학적 둥급과 연관성이 있음을 시사한다. 두경부 편평세포암종 발임과정에서 prEN의 페 틸화는 관련성이 적 을 것으로 보이며， PTEN의 다른 유전적 맨이가 발암과정에 중요할 것으로 생각한다

HuR(human embryonic-Iethal abnormal vi sion-like protein, ELAV)은 최근 염증반응 및 세 포성장 조절의 중요 기전 으로 관심 을 받고 있는 전사후 유진자 발한의 조절기전 에 관여한다 HuR은 3' -untranslated regi on에 AU- rich ele rn ents(ARE) 를 지닌 일부 mRNA들(에‘ c- fos, VEGF. COX• 2 동)의 안정화에 기여하여 mRNA의 증가 및 부가적인 딘백발 한을 증가시킨디 HuR 단백 은 이 러한 염증 및 세포성장의 생리적 기전 외에 종양발생과도 관련될 수 있으며 ‘ 유방암 난소 암 및 뇌 종잉 둥에서 f-luR의 발한증가가 보고된 바 있다 두경부 편평 세 포암종 전암성 및 양성 편평세포 병소를 대상으로 HuR의 발현양상을 띤역 조직회학적으로 살펴봄으로써 HuR의 발현이 두경부 펀평세포암종의 발생과 관련될 수 있는지 실펴 보고자 힌다 본 인 구는 80여1 의 두경부 편평세포암종 14 예의 전암성 편평세포병소 및 32 예의 양성 면평세포벙소를 실험대상 으로 이용히였다 두경 부 편평세 포암종은 AJCC(Amcrican Joint Comrnittee on Cancer) 의 분류법에 의한 TNM분류 ， 병리 조 직학적 분화정 도 및 발생부위 별로 구분히였다 면역조직화학적 염색은 mouse anti-HuR monoclonal antibody(ZymeCl Clone 3A2) 와 Envis ion kit (DAKO) 를 이용하였다 염색결괴는 2명의 병리의사가 독립적으로 결과를 평가한 후 x 2 test fol' trends (SPSS‘ ve l'si o n12) 로 통계분석을 행하였다 HuR 염색반응을 핵과 세포질 부위로 구분하여 평가하고 비 교한 결과， 핵 과 세 포질 염색 결 괴 모두 편핑세 포암종 전암성병소. 양성병소에서 유의한 차이경향을 보였으며‘ 편평 세 포암종의 경우 임상벙 기 및 발생부위에 따른 유의 한 치이경향을 보였다 특히 ， 후두에서 발생힌 편평세포암종은 세포질애서 강한 양성반응을 보였 다 본 연구결과， mRNA 안정화 인자인 HuR의 발현 및 세포 내 분포가 두경부 펀평세포암종에서 이상조절 됨 을 보였으며 그 이싱 조절 양상이 두정 부의 부위별로 차이가 있음을 확인하였다 따라서 향후에는 발현이상의 downstream effec ts 및 이} 후와의 관련성에 대힌 연 구기- 추가되어야 할 것은 여져진다

자극성 섬유종은 구강 내 만성 자극에 의해 발생하는 증식성 질환 중 하니이다 만성적 자극 또는 손상 이후 일어나는 상 치 치유 기전은 상피 각화 세포， 섬유아세포 다형핵백혈구， 대식 세포 림프구‘ 비만 세포 둥이 작용하여 일어니는 복합적이 고 정교한 반응이다 이 중 대 식 세포와 비만 세포는 손상 직후 초기 상처 치유 기전에서 직용하며 혈관 형성 . 교원질 합성 증가. wound-breaking stre ngth 의 증가， 세 포외 기질 합성 둥에 관여하고 섬유아세포 유주‘ 증식 . 육이 조직 형성 . 교원질 합성 둥에 관여하는 성장 인자와 cytokine을 분비하여 상처 치유 과정에서 핵심적인 역할을 힌다‘ 봉 띤구는 초기 싱처 치유 기전에 작용하는 세 포 중 비민 세포와 대식 세포의 l말현을 통하여 자극성 섬유종의 발생 기전을 규명히고자 하였다 2001년 1월부터 2004년 12 월까지 연세대학교 치과대 학 구강병리학 교실에서 진단펀 자극성 섬유종 88예외 정싱 구강 짐믹 9예에서 toluicli ne-blue 엽색과 CD 68을 일차 항채로 사용힌 띤역조직화학적 염색올 시행하였다 또힌 지 극성 섬유종의 조직학적 소 견을 결절형， spread type, 과세포형 혈관 증식형 등 4 종류로 분류하였으며 각각의 조직 소견 분류형에서 비만 세 포와 대 식 세포의 발현 빈도와 상관관계를 SPSS(ver. 13.0) 을 사용하여 통계학적으로 분석하였다. 자극성 섬유종과 정상 점막군을 비 교하였을 때 자극성 섬유종에서 비만 세포와 대식 세 포의 발현 빈도가 유의하게 증가하였다(p (0.05) . 지극성 섬유종의 결 절형과 spreacl type‘ 결절형과 과세포형에서 비만 세포의 발현 비 율이 유의하게 증가하였으며， 대식 세포는 조직 소견 분류 형 간 통계학적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 비만 세포와 대 식 세포간 피어손 상관 계수는 과세포형에서 0.693으로 나 타났다(p=0 . 038) 연구 결과 싱처 치유 기전에서 작용하는 인자 중 비만 세 포와 대식 세포 발현 증가가 자극성 섬유종 형성 과정에 기여하는 것으로 생각되었디 비 만 세포와 대식 세포는 조직 소견 분류형에서 차이 를 나타내어 자극성 섬유종의 조직 학적 차이에도 기여하는 것으로 생각된다

Al thou gh calcifi cation is a common finding in inflammatory salivary gland disorders , saliva ry gland tumour ra rely s hows calcifications. A case of clear cell mucoepidermoid carcinoma(MEC) of the hard pa late with extensive intra tumoural calcifïcations vis ible on computed tomog r때hy(CT) scans and histologic sections is described. The calci fï caLion in the sali va ry gland tumour 0 1' the palate recogni zed by a CT scan s hould be considered in the differential diagnosis of a MEC The mechanism of the i ntratumoural calcifi cation in our case is speculated to be a result of a secretory fu nction 0 1' the tumour cells

It is well kwon that HPV have been strongly linked to progression of or al squamous cell carcinoma‘ Effici ent im mortalization of nonnal human oral keratinocyte(NHOK) should provid further evidence for the role HPV in tumorogenes is ‘ Because IHOK(I mmortali zed human oral keratinocyte) has been considered as a moclel syst em for study ing I-!PV- linkecl oral ca rcinogenes is , it is important to pursue the differenti ati al change of IHOK cul t ure moclel during t he culture passage, The purposes of this study were to examine the cha ra r’ ct eristic clifferential changes of cul turecl immorta lizecl human ora l keratinocytes during long term passage, and to apply these results to or al carcinogenes is in the future, NI-!OK was primarily incubated at 370C and 5% C02 under KBM bullet kJt IHOK was co ntinuously cul t ured towarcl 100th passage(two times per week) , Growth curve of NI-!OK and II-!OK clepend on clùture passage was taken For examining the cha racte ri s t ic clifferential changes of II-!OK, transrnission electron microscope, 1ì'ansgluta miase activity‘ E6/E7 mRNA detect ion, a ncl tumorogenecity were done 10th II-!OK showecl sl ight polygonal flattencl cells and sometimes apoptotic cells ‘ while 100th IHOK showecl increased polygonal cell s ‘ Cultu recl 100th IHOK showed r ela tively resis tant growth to high calcium than 10th II-!OK Microvilli from 10th II-!OK was not connect ecl with each other, ancl scatte red cytokeratin fil aments of 10th II-IOK. while decreased cytokeratin filaments in cytoplasm & prominent clesmosome of 100th IHOK. During the terminal differ entiation in cultured IHOK, induction of TGase 1 activity of 10th II-!OK was higher than that of100th IHOK mRNA E6E7 expresson was cletected and unchangable in both cul tured cells There was no tumorogenecity inclucecl by both culturecl cel ls. Although late passage IHOK showecl less r esemblance to NHOK, and lower TGase 1 acti vi ty than ea rly passage IHOK, it suggested that these cells should be 110t yet fully differ entiatecl to oral squ a mous ce ll carcinoma cells

We studi ed the difTerential elTect of vitamins A, C, U. and E on normal human 이 al keratinocyte(NHOK) , HPV-16 E6E7 immor talized human oral keratinocyte(1HOK) , Oncogene transfected HPV-16 immortalized ce1ls(OTOK) , and two ol'al sq ua mous cell line(HNSCC30‘ HNSCC31) according to carcinogenesis stage. The vitamin effect was evaluated by morphology. ce ll viabi lity. a nd orgnaotypic culture Vitamin A has a greater negative effect on growth for all NHOK IHOK HNSCC. es pec ially N-Ras t rans fected IHOK, Vitamin D & E revealed no significant cell activity on NHOK lHOK, ad OTOK Vitamin C was found increased cell viability to IHOK and OTOK 1n primary oral squmaous cell ca rcino ma (HN30 ). vitam in 0 and C showing increased cell growth , but vitamin E showing no effect 1n metastatic oral squamous cell ca rcinoma(HN31), vitamin C has prol iferative effect , but vitamin 0 & E has anti-proliferative effect Vitamin A t reated normal a nd ma lignant ce1ls by organotypic cu lt ure. showed reduction of epithelial layer and in vasion to connective tissue. , especia lly in 1HOK & oncogene-transfected 1HOK, 1n conclusion. three-dimensional culture sys tem may be useful as a model to acess the efficiency of agents such as a1l trans retinoic acid can preventing progression of these premaligant lesion to maligant oral carcinoma(ch emopreventive agent) .

Amino acids a re required fo1' protein synthesis and energy sources in all living cell s. System L amino acid trans porters neutral amino aci cls i n a Na +' - independent manner. In ma 1ignan t tumors the L-type amino acid t ranspor te r 1(LA1'1), the first isoform 0 1' system L. is highly expressed to suppor t tumo1' cell growth. ln the present study, the expression 0 1' the system L amino acid transporter and BCH cytotoxicity were examined and compa red in both rat gli a l and C6 g lioma cel ls 1'he rat glia l cells expressed the L-type arnino acid t ra nsporter 2(LA1'2). the second isoform 이 system L, with its subu ni t 4F2hc. whereas the LA1'1 was not expressed. 1'he C6 glioma cells expressed LA1'1 with 4F2hc but not LA1'2 1'he [14C]L-leucine uptakes by the glial and C6 glioma cells were inhibi ted by BCH in a co ncent ration-d e pendant man ner wi th the lC50 values of 270.0 :t 13.7 μ M and 73.1 :t 4.5 μ M, respectively. 1'he cell g rowth was inh ibi ted by BCH in the time, concen tration-dependant manner in the gli al and C6 glioma cell s . 1'he rate of cell growth inhi bit ion induced by BCH in the C6 glioma cells was hi gh er than that in the gli al cells 1'hese results s uggesL that the tra ns ports of neutra l amino acids inc1uding several essenti al amino acids into rat g lial and C6 glioma cel ls a re for the most part mediated by LA1'2 and LA1'1, respectively. Therefore‘ the rat glia1 and C6 gJioma cells are excell ent tools for examing the proper ties of LA1'2 and LA1'1, respectively. Moreover, the spec너 i c inh ibi tion 0 1' LATl in cancel cells might be a new rationa le f'or anti -cancer therapy

본 연구는 한우 난포란이 체외성숙된 환경의 변화를 단백질 측면으로부터 검토하기 위하여 체외성숙 배지와 세포질내 단백질 변화와 종류를 검토하였다. 그 결과 배지 내의 단백질 발현량은 배양 4.5시간째까지 감소하였고, 배양 13.5시간째까지는 변화가 없었다. 그러나 배양 13.5~18시간 사이에 증가한 후 배양 18시간 이후에 다시 감소하는 경향이었다. 세포질내의 단백질 발현량은 배양 4.5시간째까지 증가하였고 배양 9시간째까지 급격히 감소하였다. 배양 9시간째부터 18시간째 까지는 단백질 발현량이 유사한 경향이었으나 배양 18시간째부터 24시간째까지 다시 증가하였다. 한편 체외성숙한 배지와 세포질을 2차원 전기영동하여 각각 298개 및 35개의 단백질 spot을 확인하였고, 그 중 배지에서는 28개, 세포질에서는 5개의 spot이 유의적인 변화를 확인하였다. 이들 spot 대한MALDI-TOP분석으로 배지와 세포질에서 각각 8개 및 1개의 단백질을 동정하였다. 그 종류는 aldose reductase, alpha enolase, apolipoprotein A-1 precursor, 43M1a collectin precursor, heat shock 27kDa protein, plasminogen activator inhibitor-1 precursor, thrombospondin 1 transitional endoplasmic reticulum ATPase 및 β-tubulin이었다.

본 연구는 demecolcine 처리에 의한 탈핵과 수핵란 세포질의 세포 주기가 소 체세포 핵이식란의 발육에 미치는 영향을 검토하였다. 체외에서 16~20시간 성숙배양된 난자를 극체 방출 유무 및 MI, MII기 난자로 구분하여 0.4㎕/mL demecolcine으로 40분간 처리 후 염색체 부위가 돌출된 난자는 탈핵 후 핵이식에 공시하였다. 소의 귀 피부 세포를 탈핵란에 이식하여 전기융합과 활성화 처리(Ca-ionophore+DMAP)를 거쳐 체외 배양하였다. Demecolcine처리 후 86.2%의 난자가 염색체 부위의 돌출을 보여 이 중 98.8%가 탈핵에 성공하였다. Demecolcine은 핵이식란의 발육에 영향을 주지 않았다. 제1극체 방출란 유래 핵이식란의 배반포 발육율은 극체 미방출란 유래 핵이식란에 비하여 유의적으로 높았다(18.2% vs.4.6%, P<0.05). 한편, MI 난자 유래 핵이식란의 분할율 및 배반포 발육율은(69.4%와 5.9%) MII 난자 유래 핵이식란에 비하여 유의적으로 낮았다(96.7%와 23.9%, P<0.05). 본 연구의 결과는 demecolcine 처리가 소 난자의 탈핵에 매우 효과적이며 MII기 난자가 MI기 난자에 비하여 수핵란 세포질로 더 적절하나 극체 미방출란 및 MI기 난자도 비록 제한적이기는 하지만 핵이식란의 배반포 발육을 지원할 수 있음을 보여준다.

The dentigerous cyst(DC) and giant cell granuloma(GCG) in the jaws are well known entities that have been extensively reviewed. However, a search of the literature failed to reveal simulataneous occurrence of these two lesions. We describe a case of DC displaying foci of GCG-like lesion of a 11-year-old Korean girl. The lesion exhibited the characteristic histologic features of DC, which included a lining epithelium with underlying fibromyxoid stroma. The most intersting aspect of this lesion, however, was the presence of a prominant histologic component that resembled GCG. The most probable diagnosis was GCG-like lesion in association with a DC.

The aim of this study was to investigate the cytotoxicity of dental casting gold alloys. Recently, "biocompatability" is considered the most important requirement of dental materials. Dental metals and alloys were estimated by quantity of released ions, which had influenced to living tissues. The requirement of using normal human cells for cytoxicity strudy were abruptly increased. We used the cultured normal human gingival fibroblasts to estimate the cytotoxicity of dental casting gold alloys. The product of S company(Korea, AIGIS-SOFT, AIGIS-PLUS, AIGIS-A, AIGIS-PT, experimental group) and D company's (German, Biocclus inlay, Biolor SG, Stabilor NF Ⅳ, Degulor B, control group) dental casting gold alloys were used. The morphological investigation, hemolysis test, MTT assay and SRB assay were done in vitro. In vivo, inflammatory reaction in rat was examined for 2 weeks. 1. In the result of cytotoxicity assay, there were some differences but was no significancy among the results between two group's hemolysis, MTT and SRB assay. 2. The gingival fibroblasts attached to the surface of dental casting gold alloy showed various features and increased in number as the time had passed. 3. In vivo, chronic inflammatory cell infiltration was prominent from 3 days to 1 week and inflammation was reduced as time had gone. From the aboving results, there were no significant differences in cytoxicity depending on the ratio of gold content, but showed differences depending on the ratio of total precious and non-precious metal content between two groups. In vitro study showed few differences in inflamation reaction.