Male weanling Sprague Dawley rats were used to evaluate the effect of dietary rice starch with different particle size on growth performance, intestinal function and proliferation. There were two dietary treatment: rice starch (RS), ultra finely pulverized rice starch with less than 15μm size (PRS). They were eight rats per treatment. In vitro digestibility, body weight change and organs weight were evaluated. Serum GPT, GOT and blood urea nitrogen were analyzed. Transit time, short chain fatty acid contents of cecum, and cell proliferation of duodenum and jejunum were measured. In vitro digestibility of PRS was higher than that of RS. Rats fed ultra finely pulverized rice starch for 3 weeks grew faster than rats fed rice starch. PRS group has higher weights of liver, kidney, spleen and epididymal fat pad, perhaps as a result of increased digestibility. GPT and GOT were not different between two groups. Blood urea nitrogen was higher in RS-fed rats than that of PRS-fed rats. Feeding ultra finely pulverized rice starch resulted in a proliferation of duodenum significantly. These results suggest that ultra finely pulverized rice starch increases the growth performance in weanling animals with reduced number of cells in the cell cycle of small intestine.

Photodynamic therapy(PDT) 는 특정 광 감응 물질 에 광 조사를 수행하여 세 포내애서 활성 산소종(ROS) 의 증가를 통한 암세 포의 사띨을 유도하는 방법이다 광 감응 물질은 암세 포에 선택 적으로 흡수되어 특정 파장의 빛을 홉수하여 다량의 ROS를 발생하여 암세 포의 사멸을 유도한다， 그러나 PDT 수행 시 ROS의 세 포내 작용에 따른 사띨 기전 이 영확히 알려지 지 않았고， 비 선 택 성으로 인한 정 상 세포애서의 피해 도 유발될 수 있다고 보고되었다 본 연 구애서 는 굉 감웅제인 He ma to por p h y rin을 이 용하여 구깅암 세포주인 He p2에서 광조사를 통한 세포 사멸 에 관한 연 구를 수행하였다 Confocal mi crosco py를 통한 분석에서 Hemato po r phyrin은 홉수 시 간에 따라 세포막에서 세 포질 핵 으로의 위치함을 관찰 할 수 있었고. 전기 영 동에 따른 DNA 분절 분석에서 24 시간이상 홉수된 상태 에서 ladder 패턴을 보임으로써 세 포 자띨사에 이 르는 만웅을 보였다 DCF - DA에 의힌 세 포내 ROS 분석 을 수행힌 결과 Hema to po rphyrin의 흡수 시간이 증가할수록 세포 내부에서의 ROS 발생이 증가함을 획 인 할 수 있었 다 이와 같은 결과에 따르면 Hematoporphyrin을 이용한 PDT에서 h ematoporphy ri n의 홉수 시 간에 따라 세 포 자띨사가 유도되었고. 특히 Hematoporphyrin은 흡수 시 간이 증가하여 세 포 내 부까지 충분히 Hematoporphyri n 이 작용된 경우에 서 ‘ ROS 발생애 따른 미 토콘드리아 의존적 경 로를 통해 세 포 자멸사가 유도되 었음을 확인 할 수 있었다-

사람의 타액선 종양 중 선양닝성암종(adenoid cystic carcinoma) 과 기저세포선암종(basal cell adenocarcinoma)‘ 기저세포선종(basa l cell adenoma) 은 발생학적 기원과 조직학적 소견 등 비슷한 점이 많으나 선양낭성암종은 5년 이후의 생존율이 매우 낮으며 기저세포신 암종은 저 등급의 악성도를 보이는 둥 임상적인 면에서 많은 차이를 보인다 이 연구에서는 조직병리학적으로 비 슷한 소견을 보이는 이 들 타액선 종OJ을 대상으로 이 형접합성 소실 (Loss of Heterozygosity. LOH) 을 분석하여 종양의 발생학적 기전을 파악하고자 히 였다 띤 구 방법으로는 기저세포선 종 4 예 기저세포선암종 5 예 선양낭성암종 30예에서 종양 상피세포의 유전자 변이 분석을 위해 레이저 포획 미세 절제법 (laser capture microdissection) 을 이용하여 조직에서 각각 종양 상피세포를 채취하였다 이 조직에서 각각 DNA를 추출한 후 11 쌍의 현미부수체 불안정성 표지 자(Mi crosatellite instability marker) 를 사용하여 PCR 반응을 시행하였고 이 산물을 8% p이 y acrylamide gel 애 1시간 30분간 전기 영동하여 종양 상피세포의 이형접합성상실의 양상을 판독한 후 SPSS 1400을 사용하여 통계학적 으로 분석하였다 연구 결과 모든 조직에서 종양 상피 세포의 LOH가 나타났으며 11개 표지자 중 LOH가 말현되지 않은 표지자는 없었 다 기저세포선종， 기저세포선암종‘ 선양낭성암종의 LOH 발생 빈도는 기저세포선종과 기저세포신암종과 비교하여 선양낭성암종에서 통 계학적으로 유의하게 높았으며 21번 염색체와 8번 염색체에서 차이를 보였다- 이 중 D21S1922와 D9S171 표지자에서 특히 높은 빈도 차 이 를 보였다. 기저세포선종과 기저세포선암종을 비교하였 을 때 전체 표지자에서 LOH 빈도 차이는 없었으나 21번 염색체와 9 번 염색체에 서 기저세포선암종의 LOH 빈도가 높게 나타났다 3종류의 티액선 종양에서 선양냥성암종에서 D9S168의 발생 빈도가 가장 많았다 D9S168은 기저세포선종에서 는 LOH가 나타나지 않았으나 기저세포선암종 선양낭성암종의 경우 발현 빈도가 통계학적으로 유의하게 증 가하여 종양 발생 과정에 관여하고 있음을 시사하였다

암 발생 이 후， 암세포외 섬유모세포는 cytokine. 성장인자 둥 분자를 통하여 상호 작용을 일으킨다 최근 cbemokines의 신호전달이 종양세 포와 기질 미세환경의 상호작용에서 암세포의 성장， 침윤， 이 동애 중요한 영향을 준다고 보고 되였다 본 연구에서 마이크로 어레 이 를 통하여 구강펀평 세 포암종 암세포외 구강편평 세 포암종 암조직에서 유래된 섬유모세포의 공동배양에서 섬유모세포 존재할 경우 구강 편평세포암종 세 포주애서 chemokine receptor를 포함한 다수의 유전자들이 발현이 증가되었으며， 또한 암세포가 존재할 경우 섬유아세 포에서 는 c h e mokines을 비 롯한 디수의 cytokine 유선자들의 발현이 증가 되였음을 알게 되었다. 암세포와 섬유모세포사이의 상호 작용 에서 영힘을 주는 chemokin않의 종류 및 역할을 진일보 분석 하였다 구강편평세포암종 (OSCC) 세포주 YD-lOB, YD• 38, HSC-2, HSC-3, Ca9-22 빛 구강편평 세 포암종에서 유래힌 섬유모새포 (cancer derived fibroblast; CF) 를 사용하였다， 마이크로 어레이와 re al- time PCR를 통하여 암세포외 CF의 공동배양에서 발현에 변화가 존재하는 chemokines과 cbemokine receptor를 분석하였고， Trans well assay와 wound hea ling assay을 시행하여 CCL7의 암세포 침윤에 미치는 역할을 검토하였고‘ F-actin 형광염색으로 암세 포 세포 골격의 액틴세사의 활성을 형태학적으로 관찰하였다 또한 ELTSA를 이용하여 CCL7 분비량 측정 및 발현대상을 확인하였으며 면역조직화희염색으로 구강편평세포암종 조직 에서 CCL7의 발현 을 조사하였다 암세포와 섬유모세포의 공동배양에서 CF 존재 시 암세포 에서 ch emokine recep tor를 포함한 다수의 유전자‘ CCR5. CEECAM1 동의 발헌이 증가되었으며. 또한 암세포와의 공동배양에 의해 CF 에서는 암세포가 존재 시 CCL7‘ CXCL1, CXCL3 등의 c h emokines의 발현이 증가 되었다 특히 HSC-2, YD-IOB‘ Ca9-22 OSCC 암세 포와 CF의 공동배양에서 CF의 CCL7의 발현이 증기히였다 Trans well assay와 wound healing assay 실험에서 CCL7를 처리한 OSCC 세포의 이 동은 농도 의존적으로 농도 증가에 따라 증가하였으며 a nti -CCL7에 의하여 억제 되었다 F-actin 형광염색에서 CCL7 침가에 의해 농도 의존적으로 암세포 세 포 골격 의 액틴세사의 활성을 나티내어 세포돌기가 증가도어 이동성 증가를 형태학적으로 확인하였다 CF와 구강암세포(YD- 10B， HSC-2. HSC-3‘ Ca922‘ YD- 38) 와의 공동 배양에서 CCL7 의 발현은 모두 증가 되었고 CCL7의 발현은 CF 에서 분비 되였음을 확인하였다 정상 치 은 조직 9건 OSCC 암환자의 조직 16건에 대하여 조직면역화학염색을 진행한 결과 암환자의 조 직애서 7 례 (43%) 에서 CCL7 말현 을 관칠하였다 구강편평 세 포암종 암세포의 침윤은 암세포 자극에 의해 섬유모세포가 활성화 되어 CCL7의 분비를 촉진하고 섬유모세포에 의하여 분 비된 CCL7은 암세포에 영향을 주어 암세포로 하여 금 세 포골격 의 변화를 일으키며 이는 세포이동을 촉진하여 암세포의 침윤을 유도함을 알 수 있었다‘

구강면평 세포의 종양화는 여러 단계의 발생 순서를 거치는 다단계 발생과정 (multistep carcinogenesis) 으로 이루어지며 구강백 반증 (Ol'al leukoplakia)은 구강암 진행단계에서 악성암종으로 이행하기 전단계의 전암병소로 알려져 있다 이러힌 구강백빈 증이 악성 암종으 로 진행하는 빈도는 상피 이형성의 여부에 따라 6 6~36%로 니타나는데 이렇게 정상 상피 세 포가 암세포로 변환히는 과정에서는 종양 유전.7-}. 종양 억제 유전자.ONA 수복 유전지- 등 여러 유전자에 대한 지속적인 변이의 축적 이 나타난다 본 연구애서는 구강암의 전암벙 소인 구강백반증 조직 에서 싱피와 섬유모세포의 유전자 변이 분석을 위해 레이저 포획 미 세절제법 (laser capture microdissection) 을 이 용하여 16여| 의 겁체 에서 상피세포와 성유모세포를 각각 채취하고 구강암과 구강백반증에서 유전자 변이 분석에 사용된 26쌍의 mlCI'Osatellite( MSl) 표지자를 선정하여 각각의 이 형접합성상실 (Loss of Hetel"Ozygosity‘ LOH) 과 현미부수체 불안정성(Microsatellite in stability. MSI)을 분석 하였다. 연구 결과 구강 백반증 조직의 상피와 섬유모세포 모두에 LOH/MSI 가 발현함을 확인하였다 구강백반증 전체 조직에 서 LOH가 많이 나타나는 유전자의 위치는 염색체 21qll.l-21.1. 9p21-22. 3pI4-25. 17p12-14였고. MSI는 17p12-14‘ 5q21-23, 10q22-23 부위에서 많이 나타났으며 LOH는 섬유모세포 보다 상피세포에서. MSI는 상피세포 보다 섬유모세포에서 상대적으로 많이 발현하였다 상피이형 성이 있는 구강백반증을 그렇지 않은 경우와 비교하였을 때 06S264 표지자에서만 특이적으로 상피이형성이 있는 검체에서 LOH가 니티 났으며 나머지 표지자에서는 상피이형성괴 LOH 딸현 사이에 통계학적인 유의성이 없었다

A case of a distinctive variety of basalαd squamous cell carcinoma (B8CC) of the floor of mouth is described Histologic evaluation of the tumor showed lobules and aggregates of medium-sized basaloid cells with distinctive periph eral palisading and focal areas of comedo- necrosis. This appearance together with microcystic spaces simulated that of an adenoid cystic carcinoma. Accompanying epithelial dysplasia of the overlying mucosa was found. Immunohistochemistry of the tumor revealed diffuse strong expression for cytokeratin AE1/3, focally positive for Epithelial Membrane Antigen in the inner cells of tubular structures However, CEA, 8-100, smooth muscle actin, and vimentin were negative. The histologic differential diagnosis considered were adenoid cystic carcinoma and adenosquamous cell carcinoma Immunohistochemistry and awareness of this unusual pattern of B8CC will facilitate the correct diagnosis being reached.

Human gingival fibroblasts are necessary for oral homeostaslS These cells are fundamental in tissue healing and tissuc remodeling processes under a response to physiological actions such as mastication, Collagen and elastin, that are extracell ular glycoprotein of gingival fibroblast, are found in all animals, '1γpe 1 collagen is most dominant protein found in human gingival fibroblasts , Matrix metalloproteinase-1(MMP-1) has a role play in destruction of metabolism of extracellular matrix(ECM) and MMP-1 can destroy many ECMs as well as non-ECM molecules MMP-1’s local activation is conytolled by tissue inhibitor of metalloproteinase-1(TIMP-1) , Therefore, it is important to have a balance between in both s ituations MMPs and TIMPs of increased 0 1' decreased extracelluar matrix molecules, The purpose of trus study is to find out the effect of physical stimulus to human gingival fibroblast on mRNA, proteins of collagen 1, elastin, MMP-1, and TIMP-1 Healthy human gingival fibroblasts were separated and cultur때 in DMEM(Dulbeco’s Modified Eagle’s Medium) , When the sample reached to confluence state, it was separated with 0,25% t rypsin and 0‘ 53mM ethylendiaminetetraacetic aCld Separated cells were centrifuged in a cell culturing flask at 1000rpm for 30, 60, 120 mmutes Then it was forced by 35g/cm' continuously, The obtained results that expression of mRNA using histological study and Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) , expression of protein using Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA) for this study, At 30minutes after cen trifuging, there were s pindl e shaped gingival fibroblasts with long processes parallel to other cells in the control group , However the cell density was simil ar to compared group, At 60minutes after centrifuging, spindle shaped human gingival fibroblast with relatively long process, less densely packed, At 120minutes after centrifuging, cell processes were lengthened 2-3 times‘ and cell density was lower, At 30-60 minutes after centrifuging, it was increased by 1,3-1,7 times in expressoin of collagen 1 mRNA as compared with comparison group, However, there was no change in elastin, TIMP-l, and MMP-1, At 120 minutes after centrifuging, The revealed collagen 1 mRNA was increased 3 times as compared with comparison group, It was increased 2 times in elastin , 12 times in TIMP-1 as compared with comparison group, However, there was no change in MMP-l. At 30-60 minutes after centrifuging, it was increased by 1.1 times in revealing of protein revealing in collagen 1, TIMP-1 But there was no cha nge in elastin, MMP-1 At 120 minutes after centrifuging, it was increased by 1,2 times in revealing collagen 1 protein, 11 times in elastin, 12 times in TIMP-l, but there was no change in MMP-l. ln conclu s ion, it increased in revelation of collagen 1 ,elastin and TIMP-1 by continous stimulus in human gi ngival fibroblast, But there was no change in revelation of MMP-l Therefore, th is type of pressu re is one of the components for healing of gingiva l fibroblast

Laser is used to prevent the early dental caries in dental f ield and to apply for treatment of stomatitis and hyper sens it ivity , and laser mass Recently it is reported that laser i1'r adiation affect on soft tissue treatment and bone 1'emodelling after dental implantation. The purpose of this study was to examine laser irradia ti on effect on activity of normal human osteoblast on titanium plate in vitro by various laser wave length, and to observe morphologic change of NHost on LiLa nium plate and to a nalysis concentration of Ca"++ , IP and ALP NHost were cultured in DMEM containing 10% FBS, and observed by in verted microscope 1"or attatchment to the surface of titanium plate. Ca ++, I.P. , and a lkaline phosphat ase(ALP) concent ration in medium was calculated during 4 weeks, which was treated with Wilcoxon rank, Anova test and linear regression. The obtained results were as follows Morphologic changes showed rapid growth rate of NHost ++ at 3 days of laser lrradiatlOn ln spite of laser wave type, Ca" and P concentration was decreased at 2 weeks and was the hig hest at 3 weeks, but decreased at 4 weeks In spite of laser wave type, ALP concentration was decreased at 2 weeks but was increased at 3-4 weeks, From the aboving results, in spite of laser wave type, there were rapid growth rat e of NHost a nd no significant of Ca"++ , IP and P concen tr ation but these concentration showed predominant change than that of control

Many researchers are interested in wound healing in the t reatment of burns, prevention of post surgical adhesions and cosmetic s urgery by excess collagen production and scar formatlOn Synthetic epidermal substi tutes with cultured epi thelial cells seem to be an attractive strategy since keratinocytes have been demonstrated to modulate fibroblast growth and collagen synthesis. Bioa bsorbable and biocompatible chitosan structurally mimics hyaluronic acid. Recently, a bio compatible synthesi zecl ch itosa n-PVP(polyvinyl pyrrolidone) hydrogels demonstrated in vitro biocompat ibi li ty for bio medical applications . However. there is no re port on this hydrogeJ"s ability to modulate human gingival fibroblast growth. The purpose of this study were to investigate different growth modulation between human gingival fibroblast and normal human oral keratinocyte by chitosan- PVP hydrogel, and to apply this biocompatible synthetic polymer to oral and maxillofacial wound healing. We have synthesized a hydrogel from chitosan-PVP and examined its effect on human gingival fibroblast growth modulation in vitro. Non-toxic and biocompatible hydrogel with human gingival fi broblasts and epithelial cells was tested by MTT assay. HGF showed a higher growth proliferation than that of NHOK after cell seeding. In MTT assay, 30% hydrogel leach out products showed a higher cellular viability in NHOK than that of any other products. In MTT assay, 30% hyclrogel leach out products showed relatively lower cellular viability of HGF ln growth profile, NHOK showed about 7 fo lcls higher than HGF after 1 day, while about 2 fo lds higher after 5 days. And also NHOK showed above about 70% cell ular via bility from 1 to 7 days. It suggested that Chitosan-PVP hydrogel would inhibit relatively the growth of HGF and s timulate the growth of NHOK_ This phenomenon may prove to be of use in wound management 0 1' oral and maxillofacial area as epitheli al substitutes.

The purpose of this study was to evaluate the role 0 1' integrin a 3 and integrin ß 1 in the oral squamous cell ca rcinomas. For this study‘ 10 specimens diagnosed as squamous cell carcinoma referred to the Dept. of Oral Pathology. School of Dentis try, Kyung Hee Univers ity, and 5 specimens of normal oral mucosa without any inflammatory cha nges were used as experimenta l and co nt rol groups, respectively. AlI s pecimens; experirnental and control group were f ixed in neutral f ormalin so lu tion and embedded in paraffin, and then the serial tissue section were rnade 5i1m in thickness and processed for imrnunohi stochemical observatlon The specimens were incubated with prirnary antibody against integrin a 3 r integrin ß 1‘ each was diluted at 1;100, followed by the super sensit ive non- biotin horse r adish peroxidase detection sys tem with DAB as chromogen‘ After counters ta ining with Gill ’s hematoxylin stain method and mounted and examined under the light microscope. Based on the intens ity of the immunoreactivity, intensity of the immunity was scored no ep ithelial stain, weak 0 1' focal epitheli al sta in, modera te 0 1' focal intensive epithelial stain, intense genera lized epitheli al s taining for the e pithelia l, and co nnective ti ssue component in squamous cell carcinomas, and normal oral mucosa on each Expression of integrin a 3 in t he oral mucosa was negli gible. Expression 0 1' integrin a 3 in expression in the or al s mnus cell ca rcinoma was ve ry wea k, but the express ion was increased in poorly differ entiat ed type of the oral squamous cell carcinomas ln the oral mucosa , expression of in tegr in ß 1 ra nged from weak to moderate in the cytoplasm and the cell membra nes of the kera tini zed and basal cell layer. Nuclei were mainly integrin ß 1 negative‘ but rarely revealed weak expression. ln sq uamous cell carcinoma, expression of integrin ß 1 was ntense notably in the cytoplasm, cell membrane a nd nuclear membra ne Nuclei of several tumor cells revealed moderate expression of integrin ß 1. Expression of integrin ß 1 was increased the poorly diffe rentiated type of in squamous cell carcinoma compare to that in moderate or well diffe rentiated type of oral squamous cell carCllìoma These results suggest integrin a 3 and integrin ß 1 may be influ enced the development and growth of the squamous cell carcima .

본 연구는 소 배반포의 내부 세포괴로부터 다능성(pluripotency)을 지닌 배아 줄기 세포(embryonic stem cell) 또는 그 유사 세포를 분리 및 배양함으로써 줄기 세포 관련 분야의 기반 기술을 확립하고자 하였다. 소 체외수정란을 10～12일간 체외배양하여 생산된 부화 배반포를 세포분열이 불활성화된 생쥐 태아 섬유아 세포(mouse embryonic fibroblast, MEF) 위에서 배양하여 콜로니 형성을 유도하였으며, 이들로부터 내부 세포괴 유래의 형태를 지닌 것만을 광학현미경 하에서 물리적으로 분리하여 약 5～7일 간격으로 계대배양을 실시하였다. 이러한 방법을 통하여 배아 줄기 유사 세포의 특성을 40계대 이상 유지하는 2개의 세포주를 확립하였다. 각각의 세포주들은 높은 alkaline phosphatase(AP) 활성을 지니고 있었으며, 형광 면역 염색법과 PCR 기법을 사용하여 Oct-4, Nanog, STAT3, SSEA3 및 SSEA4의 발현을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때 ,본 연구에서는 소 배반포로부터 배아 줄기 세포주를 확립하는 제반 기술이 확립되었다고 판단되며, 향후 관련 분야 연구에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

본 연구는 소의 초기 난할 단계인 2 또는 4세포기 수정란의 특정 분할구가 배반포 단계의 내부 세포괴(Inner Cell Mass) 와 영양막 세포(Trophectoderm cells)로의 발달 운명이 미리 정해지는 지를 확인하기 위해 실시되었다. 먼저 생쥐의 체내 수정란과 소의 체외 수정란에서 배반포의 영양막 세포에서만 특이적으로 발현하는 cdx2 단백질의 발현 양상을 조사하였다. 또한, 소의 경우 2세포기와 4세포기가 내부 세포괴와 영양막 세포로 나눠지는 시점인지를 조사하기 위해 2 또는 4세포기의 특정 분할구에Dextran의 주입 실험과 분할구 제거 실험을 통해 ICM과 TE 형성을 확인하였다. cdx2의 발현 경향은 생쥐와 소의 2세포기일 때 대칭과 비대칭적으로 발현되는 것을 확인하였다. 생쥐의 4, 8세포기 및 상실배기에서는 분할구 전체에서 발현되었으나, 소 수정란의 분할구에서는 전체 또는 부분적으로 발현되었다. 또한, 생쥐와 소의 배반포기에서는 영양막 세포에서만 발현이 되는 것을 확인하였다. 소 수정란의 2세포기와 4세포기 단계에서 특정 분할구에 주입된 Dextran은 배반포의 내부 세포괴와 영양막 세포의 양쪽에 분포된 것을 관찰할 수 있었다. 2세포기 단계에서 하나의 분할구가 제거된 수정란 역시 ICM 및 TE 세포를 지닌 정상 배반포로 발달함을 확인하였다. 따라서 본 연구 결과는 영양막 세포에서만 특이적으로 발현하는 cdx2의 발현이 2 또는 4세포기 단계 소 수정란에서는 특별한 차이를 보이지 않으며, 궁극적으로 난할 초기에는 ICM과 TE 세포로의 운명이 결정되지 않는다는 것을 보여준다.

본 연구는 사람 H-transferase가 과발현하는 돼지 체세포주를 개발하는데 있다. 돼지 세포에 사람 H-transferase 유전자를 발현시키는 것은 이종간 장기 이식에 있어서 초급성 거부 반응을 방지하기 위한 한 가지 방법이다. 본 연구에서는 과발현 벡터를 구축하기 위하여 사람 H-transferase을 HepG2 세포로부터 동정하였으며, 이 유전자를 CMV promoter를 이용하여 발현할 수 있도록 포유동물 발현 벡터인 pRc/CMV 벡터에 삽입하였다. 또한, 돼지 산자의 귀 세포를 이용하여 체세포를 수립한 후 jetPEI DNA transfection reagent를 이용하여 벡터를 도입하였고, 300 μg/ml의 G418로 12일간 선별하였다. PCR을 이용하여 선별된 colony들을 분석한 결과, 벡터가 도입되었음을 확인하였고, RT-PCR을 이용하여 사람 H-transferase mRNA가 발현하는 것을 확인하였다. 본 연구에서 확립된 세포주는 사람 H-transferase가 과발현하는 형질 전환 돼지의 생산에 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

체세포의 배양 방법은 체세포 핵이식에 의한 형질 전환 돼지 생산에 있어서 중요한 요인 중 하나이다. 본 연구에서는 돼지 태아 섬유 아세포의 효율적인 배양 방법을 수려하였다. 돼지 태아 섬유 아세포는 임신 33일째 태아로부터 제조하였으며, 돼지 태아 섬유아세포의 증식을 혈청과 배지 종류별로 분석하였다. 그 결과, 15% ES screened FBS가 포함된 DMEM 배지에서의 배양은 15% FBS보다 세포수의 증가가 훨씬 더 빠르게 나타났다. 또한, 태아

임신의 성립 및 유지에 중요한 역할을 하는 자궁내막세포에 통로의 존재를 확인하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 통로는 일반적으로 중추신경계에 풍부하게 존재하면서 세포의 안정막 전압을 유지시킨다. 역전사 중합 효소 중합 반응과 면역 세포 화학 염색 방법을 이용하여 자궁내막세포에 존재하는 통로를 조사한 결과, TASK-1, TASK-3, TREK-1, TREK-2 및 TRAAK의 발현이 확인되었다. TASK-3와 TREK-1은 핵을 포함한 세포 전역에 발현

본 연구는 체세포를 이용하여 생산된 복제 한우 수소의 번식능력을 검토하기 위해 실시하였다. 복제 한우 수소(C-38 및 C-39) 또는 일반 한우 종모우로부터 정액을 채취하여 정자의 수 및 동결 전후의 생존성 등을 살펴보았으며, 정자의 운동성 등은 computer assisted sperm analysis(CASA)를 이용하여 측정하였다. 또한, 이들의 수정 능력을 확인하기 위하여 체외수정과 인공수정을 각각 실시하였다. 정액 성상에서는 복제 수소들과 일반 종모우 간에 정액의 양, 정자의 농도 및 동결융해 후의 생존성 등에서 차이가 나타나지 않았다. CASA를 이용한 분석에서 운동성, 곡선 운동 속도(VCL), 직선 운동 속도(VSL) 및 평균 진행 속도(VAP) 등은 복제 수소의 정액이 일반 종모우의 정액에 비하여 유의적으로 높았다(p<0.05). 체외수정에 따른 수정란의 분화율 및 배반포로의 발달율은 복제 수소와 일반 종모우 간에 차이가 나타나지 않았다. 복제소 정액(C-38)을 이용하여 인공수정을 한 5두의 체세포 복제 대리모에서 암수 각각 한 두씩의 건강한 복제 후대 송아지 2두를 생산하였다. 이상의 결과를 종합하여 보면, 실험에 공시된 복제 수소 개체 간의 차이가 나타나기는 하였지만, 복제 수소는 정액 성상과 정자의 운동성 등에서 일반 종모우와 차이가 없었으며. 또한 인공수정을 통해 송아지를 생산함으로써 정상적인 번식능력이 있음을 확인하였다.