Glycoproteins isolated from fruit bodies and mycelial cultures of mushrooms exhibit anti-carcinogenic actions in human cancer cells and animal tumor cells by induction of apoptosis. Here, we report that isoflavone-conjugated glycoproteins (designate Gluvone), exhibit strong anti-carcinogenic effects on human breast cancer MCF-7 cells by induction of apoptosis. Gluvone with 9.4 kDa of molecular weight was isolated from submerged-liquid culture of Agaricus blazei mycelia (ABM) in soy flake-containing liquid medium. MCF-7 cells were incubated with various amounts of Gluvone (0~250 μM) for a period of 6 days. Gluvone exhibited anti-proliferative actions in a dose-dependent manner and 62% growth inhibition at 200 μM for 4 days relative to control. Hoechst 33258 staining analysis revealed that Gluvone induced formation of apoptotic bodies. Gluvone was associated with down-regulation of anti-apoptotic Bcl-2 protein expression as well as up-regulation of pro-apoptotic Bax protein expression. Gluvone treatment induced proteolytic activation of caspase-9 and caspase-3 through cytochrome c release from mitochondria to cytosol as well as concomitant degradation of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP). In addition, Gluvone induced activation of caspase-8. Taken all together, these results indicate that the anti-proliferative effect of Gluvone is associated with induction of apoptotic cell death through the mitochondrial dysfunction pathway mediated by enhancement of Bax protein expression and suppression of Bcl-2 protein expression.

본 시험에서는 참외후작으로 참외하우스를 활용하여 고온성버섯으로 알려진 신령버섯(Agaricus blazei)의 재배가능여부를 조사하기 위해 실시하였다. 참외하우스는 파이프 길이 8.5m, 폭 4.8m, 길이 48m 하우스를 이용하였으며, 외부에 95%차광막을 2중으로 설치하여 직사광선을 차단하였고, 균사배양기간에는 스프링클러를 10m 간격으로 설치하여 외벽에 물을 흘려주어 최고온도를 30°C 이하로 관리하여 주었다. 차광막 설치효과는 맑은날 외부 105,000lux, 내부 300~350lux, 흐린날 외부 43,000lux, 내부 30~100lux로 2중 차광막 처리로 인해 빛이 97%이상 차단이 되는 것으로 나타났다. 스프링클러 효과는 하우스내부 온도가 설치전에는 최고 43.3°C였으나, 설치후 최고 35°C 이하로 낮아졌다. 균사배양시기의 일교차는 15~20°C 정도가 나는 것으로 확인되었지만 신령버섯의 배양기간은 관행재배에 비해 2일정도 지연되거나 유사한 것으로 나타나 배양중 큰 온도편차가 균사배양일수에 큰 영향을 미치지는 않았다. 균사배양기간은 20일, 초발이소요일수는 7일이 걸렸으며, 종균접종후 첫수확까지는 총 43일이 소요되었다. 각 주기별 생산량은 1주기 180kg, 2주기 150kg, 3주기 50kg, 4주기 100kg, 5주기 80kg, 6주기 60kg을 수확하였으며, 주기별로 20~30kg정도 수량이 감소하였다. 총 수확량은 620kg이고 단위면적당 생산량은 23.4kg/3.3㎡로 확인되었다. 시기별 버섯발생상황은 7월 초순 1주기 버섯이 발생한 후 10일간격으로 주기가 진행되었으며, 7월말에서 8월중순까지 혹서기에는 버섯발생이 현격이 감소하는 것으로 확인되었다. 8월 중순이후 4주기 버섯이 발생하였으며, 온도가 낮아지기 시작하면서 주기간격은 다소 길어지는 경향을 나타내었다.

신령버섯은 항암작용과 더불어 면역강화작용 등 약용으로서 이용되고 있습니다. 최근에는 신령버섯 재배농가에서 새로운 병징 현상이 보고되어 내생세균에 대한 분자생물학적 방법으로 조사하였다. 병징을 나타내는 수집된 기형버섯을 eubacterial 16S rDNA 영역을 이용하여 PCR한 결과 기형버섯만 증폭되었다. 이 영역을 부분적으로 염기서열을 결정한 결과 CFB bacterium과 유사성이 가장 높았고, 이 염기서열을 이용하여 프라이머를 디자인한 후 nested PCR를 부위별로 확인한 결과 기형을 일으킨 갓의 주름살 부위에서 가장 강하게 증폭되었고 포자수확도 되지 않았으며 배양불능세균 group인 CFB bacterium임을 확인하였다.

Agaricus blazei is well known as a traditional medicinal mushroom and it has been shown to exhibit immunostimulatory and anti-cancer activity. However, the cellular and molecular mechanism of apoptosis of cancer cells is poorly understood. In this study, we have investigated whether A. blazei extract (ABE) exerts anti-proliferative and apoptotic effects on human leukemia THP-1 cells. It was found that ABE induced a time- and dose-dependent increase in leukemia cells apoptosis through caspase-3 activation and PARP cleavage. Activation of caspase- 9 induced by ABE suggested that ABE-induced signaling was mediated through a mitochondrial death pathway. In addition, we observed an elevation of ROS and a consequent loss of mitochondrial membrane potential, further suggesting that ABE-induced death signaling was mediated through a mitochondrial oxygen stress pathway. The antioxidant Nacetylcysteine, however, opposed ABE-mediated mitochondrial dysfunction, caspase activation, and apoptosis, supporting the role of ROS in the apoptotic process. We conclude that ABE induces apoptosisin human leukemia cells through a reactive oxygen species and caspase-dependent mitochondrial pathway.

Agaricus blazeiMurill is an edible mushroom distributed in Brazil and presently cultivated in other areas, including Korea, Japan, and China. Its chemical components, including steroids and lectin and various polysaccharides have been widely studied. For this, we used U937/vector and U937/Bcl-2 cells, which were generated by transfection of the cDNA of the Bcl-2 gene. As compared with U937/vector, U937/Bcl-2 cells exhibited a 4-fold greater expression of Bcl-2. Treatment with 0.5 or 4 mg/ml A. blazei Murill for 24 h produced morphological features of apoptosis in U937/vector cells, respectively. This was associated with caspase-3 activation and PARP degradation. In contrast, A. blazei Murill-induced caspase-3 activation and PARP degradation and apoptosis were significantly inhibited by z-DEVD-fmk in U937 cells. Bcl-2 overexpressing cells exhibited sustained caspase-3 activation and expression levels of the Bcl-2 proteins during A. blazei Murill-induced apoptosis. In addition, these findings indicate that Bcl-2 inhibits A. blazei Murill-induced apoptosis by a mechanism that interferes with Bcl-2 degradation and activity of caspase-3 that is involved in the execution of apoptosi.

The optimization of conditions for the cultivation of Agaricus blazei was conducted in order to do mass production of mycelia by submerged cultivation. The carbon source and nitrogen source of medium were selected with high fructose syrup and soybean flake, and their optimized concentrations were determined as 8% and 3% respectively. Operation conditions were also optimized as the culture temperature of 25oC and pH of 6.5. The production of mycelia in the fermenter with optimized culture conditions has reached to 8.04 g/L, which was about 3 times as much as that of conventional flask cultivation. In the fed-batch cultivation, the productivity of Agaricus blazei mycelia was 12.01 g/L during 10 days.

항암효과가 뛰어난 건강식품으로 알려진 아가리쿠스 버섯은 많은 약리성분을 함유하고 있는 것으로 알려져 있다. 아가리쿠스 버섯의 주요성분을 동정하기 위하여 우선 일반성분을 분석하고 그것을 약리성분 분석의 기초자료로 이용하고자 하였다. 건조 아가리쿠스 버섯의 일반성분은 일본산 아가리쿠스 버섯과 큰 차이는 없었으나, 당질의 함량이 일본산이 41.56%인 반면, 한국산은 5.40%로 매우 낮게 나타났다. 무기물의 조성은 일본산이 K, Phosphate, Si, Chloride 그리고 Mg이 각각 65.49%, 12.7%, 12.25%, 4.26%, 2.67%의 순으로 나타나 있는데 반해, 본 실험에서 사용한 한국산 아가리쿠스 버섯의 무기물 조성 함량은 K, Phosphate, Chloride 그리고 Sulfate가 각각 45.77%, 27.78%, 8.16%, 7.80%의 순으로 나타났다 아미노산은 cysteine을 제외한 16종의 아미노산이 모두 존재하는 것으로 나타났으며, 아미노산중 glutamic acid가 19.33%로 가장 많이 함유된 것으로 나타났다 재배 아가리쿠스 버섯의 당 중 그 조성비율이 가장 높은 것은 glucose로 그 함량은 26.36 ㎎/g으로 나타났다. 지방산은 linoleic acid가 78.3%로 지방산의 대부분을 이루고 있는 것으로 나타났으며, 그 중 불포화 지방산의 함량은 일본산 아가리쿠스 버섯이 70.5%인데 반해, 한국산 아가리쿠스 버섯의 함량은 80.7%로 일본산 아가리쿠스 버섯보다 다소 높게 나타났다.

아가리쿠스버섯에서 분리한 단백다당류를 분무건조한 분말의 저장안정성을 알아보기 위하여 저장 중 흡습특성을 조사하였다. 평형수분함량은 수분활성도가 높아짐에 따라 빠르게 증가하는 양상이었으며, 높은 온도에서 낮은 함량을 나타내었다. 단분자층 수분함량은 BET식보다 GAB식이 높은 유의성을 나타내었다. 수분활성도가 증가함에 따라 필요로 하는 흡습에너지가 낮아져 흡습엔탈피는 감소하여 흡습이 쉽게 이루어짐을 알수 있었다. 등온흡습곡선의 적합도는 Kuhn과

분자량에 따라 다양한 생리활성을 나타내는 아가리쿠스 버섯에서 분리한 단백다당류를 이용하여 이들의 유동특성을 비교하였다. 막분리 및 분무건조된 단백다당류의 절대분자량은 SEC/MALLS로 분석하였는데, Cumulative weight fraction이 50%인 지점에서의 분자량은 SD-1,2와 3이 각각 로 나타났다. 분자량이 다른 SD-1, 2, 3용액 에 대하여 전단응력을 측정한 결과, 전단속도가 증가함에 따라 전단응력이 직선적으로 증가하였고

아가리쿠스버섯의 약효성분으로 고형 음용차를 제조하기 위하여 건 버섯을 열수추출, 에탄올 침전, 투석, 동결건조 등의 처리를 행하여 단백다당체를 분리하고 부형제로 dextrin(DE=9, DE=23) 및 -cyclodextrin(CD)을 각각 첨가하여 분무건조한 후 압출하여 과립을 제조한 다음 부형제의 종류에 따른 과립의 품질특성을 조사 비교하였다. 과립의 수분함량은 DE=9 첨가구에서 가장 높았고, 총당 함량은 -CD, DE=23, DE=9 첨가

아가리쿠스 버섯에 있어 각 온도별 건조 품질을 살펴보았다. 우선 갓과 대의 건조시간은 5에서 모두 29시간이었으며 10의 경우 갓과 대 모두 10시간 소요되었으며 실온에서 음건할 때에는 갓과 대가 모두 3일 정도 소요되었다. 수분감소율은 온도가 높을수록 켰으며, 부위별로는 5에서 초기감소율이 갓보다 대가 크게 나타났으며 최종수분함량은 갓이 대보다 적었다. 반면에 10와 실온에서 갓의 수분감소율이 켰으며, 최종수분함량은 갓이 적었다. 수분활성도는

본 연구에서는 건강기능성 버섯으로 알려진 A. blazei 에 대하여 재배시 농가에서 사용하는 배지의 종류에 따라 생산된 자실체의 면역 기능성 차이를 규명 할 목적으로 in viro 상태에서 추출다당체의 세포에 대한 영향을 살펴보았다. 기능성 약용 버섯인 A. balzei 에 대하여 재배시 농가에서 사용하는 배지에 따른 in viro 상태에서 세포에 대한 다당체의 영향을 검토하였다. 추출용매에 따른 항종양 물질의 저해효과는 약 25∼30% 수율범