Glucansucrases are members of GH70 family of glycoside hydrolases and mainly produced by lactic acid bacteria such as Leuconostoc, Lactobacillus, and Weisella species. Glucansucrases use sucrose as a substrate to synthesize glucans as well as to produce oligosaccharides by transferring glucose moiety from sucrose onto acceptor carbohydrate molecules. It is known that some oligosaccharides produced by the reaction of glucansucrase show functional properties such as prebiotics and immunostimulatory activities. In this study, lactic acid bacteria which produce glucansucrase were screened from a variety of fermented foods, vegetables, and fruits collected from various area of Korea. Among 149 lactic acid bacteria strains which were isolated using BCP agar plates, 8 strains were selected which showed high glucansucrase activities. By nucleotide sequence analysis of 16S rRNA gene, strain no. 26-4 and 109-4 were identified as Leuconostoc mesenteroides, strain no. 95-4 strain was L. lactis, strain no. 92-4 and 112-1 were Weissella kimchii, strain no. 94-1 and 95-1 strains were W. confusa, and strain no. 113 was W. cibaria. When the oligosaccharides produced by the reaction of glucansucrase were analyzed using Bio-LC after these lactic acid bacteria were cultured into sucrose-containing media, the chromatograms of all bacterial showed unidentified peaks which implied the newly synthesized oligosaccharides

목 적: 저습환경 근로자들은 환경적인 요인으로 건성안이 증가하는 실정이다. 따라서 건성안 선별검사방 법에 따른 유병률을 알아보고, 비교분석하여 이에 따른 기준을 알아보고자 한다. 방 법: 충남지역 이차전지(리튬이온) 생산 공정에서 환경적으로 밀폐된 공간인 클린룸(상대습도 1%미만) 에 근무하는 근로자 543명을 대상으로 하였다. 자각적으로 McMonnies 설문지와 일반적 특성을 설문 조사하 였고, 타각적으로 눈물막 안정성검사와 눈물량 검사를 실시하였다. 결 과: 4개의 건성안 선별검사에서 모두 양성으로 진단 받은 사람은 72명이었고 음성으로 진단 받은 사 람은 471명이었으며, 양성으로 진단 받은 사람 72명과 일반적인 특성과의 상관관계를 분석해 본 결과 수면 시간과 음의 상관관계가 있었다. 건성안 검사방법에 따른 신뢰도 분석한 결과 맥모니 검사가 0.53으로 가장 일치도가 높았으며 타당도 분석인 ROC곡선을 비교결과도 0.90으로 가장 높았다. 건성안 선별검사에서 모두 양성으로 진단받은 환자여부에 관한 예측 적합 모형 분석결과 1차 맥모니검사 후 맥모니검사에서 양성으로 진단받은 환자에 대해 2차 눈물량 검사를 하는 방법이었다. 결 론: 저습 환경 근로자들의 건성안 판정은 수면시간과 유의한 관계를 보였다. 따라서 저습환경 근로자 들의 수면시간을 일반적으로 권고되고 있는 8시간 수면으로 교육하여 수면량 조절을 할 필요가 있다. 본 연 구에서 4개의 건성안 선별검사방법을 비교분석해본 결과 가장 신뢰도와 타당도가 높은 맥모니검사를 눈 건강 검진 시행시 문진에 추가하여 건성안 환자 여부를 판별하는데 도움이 되리라 사료된다.

나리에 있어 Cucumber mosaic virus(CMV) 바이러스 저항 성 육종을 위해 주요 모본 및 부본으로 이용한 우수 유전자원 에 대해 바이러스 저항성 검정을 실시하였다. 바이러스 접종 원은 CMV-Taean으로 농업과학원에서 분양 받아 담배에 증식 하여 접종하였다. 바이러스 접종 식물체는 조직배양을 이용 하여 ‘Connecticut King’, ‘Party Diamond’, ‘Prato’, ‘Casa Blanca’, ‘Mona’, ‘Dublin’, ‘Rodrigo’, ‘Brunello’, ‘Avocado’ 품 종과 ‘FA08-17’ 계통에 대해 바이러스 무병주를 생산하여 실 험에 이용하였다. 바이러스 접종 효율을 높이기 위하여 접종 횟수를 1회와 2회로 나누어 실시하였으며 인산염 버퍼의 pH 를 6.9, 7.2, 7.5로 달리하여 접종하였다. 2회 접종, 인산염의 pH 6.9에서 접종 성공률이 높았다. ‘Casa Blanca’, ‘Avocado’ 품종의 잎에서 약한 모자이크와 노란색의 mottle 증상이 관측 되었으며 ‘Brunello’, ‘Rodrigo’, ‘FA08-17’에서 Hypersensitive response like 반응이 관찰되었다. ‘Brunello’, ‘Rodrigo’ 품종 에서 RT-PCR 검정 결과 바이러스가 검출되지 않았다. Reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) 결과 바이 러스가 검출되었던 ‘Connecticut King’, ‘Prato’, ‘Casa Blanca’ 의 경우 Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) 흡광도 가 낮게 나타났다. RT-PCR과 ELISA 검사 결과 잎과 구근에 서 CMV 검출이 다르게 나타남에 따라 나리에 있을 것으로 추측되며 바이러스 감염과 연관된 TOM1, OBE2, DND1 유 전자를 대상으로 발현 분석을 하였으나 유의한 결과를 얻지 못하였다.

목적 : 본 연구는 경도 인지장애 선별을 위한 전산화 인지기능 평가의 체계적 고찰을 통해 임상 및 연구의 기초 자료를 제공하고자 하였다. 연구방법: 2015년 11월 한 달 동안 Embase, PubMed, PsycINFO, The Cochrane Library에서 “computerized” OR “computer-based” AND “cognitive assessment” OR “screening test” AND “mild cognitive impairment”의 키워드를 검색하여 최종적으로 12개의 연구에서 9개의 전산화 인지기능 평가를 추출하였다. 연구의 질적 수준, 평가 구성 비율, 대상자 선정기준, 평가 운영체제, 시행방법, 평가영역, 신뢰도, 민감도 및 특이도를 분석하였다. 결과 : 12편의 연구 질적 수준을 분석한 결과 수준Ⅱ의 연구는 11편으로 전체의 91.7%였고 수준Ⅲ 단계의 연구는 1편으로 전체의 8.3%를 차지하여 전반적인 근거수준은 대체로 높았다. 경도 인지장애 대상자 선 정을 위해서 간이정신건강상태검사(Mini-Mental State Examination; MMSE)을 포함해 다양한 평가를 사용하고 있었다. 9개의 전산화 인지기능 평가 중 알츠하이머형 치매 선별도 가능한 것은 3개였다. 대부분의 평가는 컴퓨터 기반으로 3~30분 이내의 시간에 시행되고 있었으며, 키보드 또는 마우스를 이용한 자기시행법이 가장 많았고 터치를 이용한 방법이 다음으로 많았다. 각 평가별로 평가영역에 차이가 있었 으나 기억력 평가는 모든 평가에 포함되어 있었으며 평가의 신뢰도는 대체로 높았다. 평가의 민감도 및 특이도는 지필평가와 유사하거나 낮은 것으로 나타났다. 결론 : 본 연구를 통하여 경도 인지장애 선별을 위한 전산화 인지기능 평가의 특징을 종합적으로 알아보았다. 연구결과는 추후 경도 인지장애 선별을 위한 전산화 인지기능 평가 개발을 위한 기초자료로 활용될 수 있을 것이다.

The Baermann funnel method requires three to four Kimwipes tissues for clean nematode extraction. To find more efficient and economical nematode extraction paper, 14 different kinds of tissue papers were tested and compared with Kimwipes tissues. Nematode species used in the extraction efficiency test were juvenile (J2) of Heterodera spp., J2 of Meloidogyne spp., Pratylenchus spp., Rhabditis spp., Acrobeloides spp., Panagrolaimus spp., Poikilolaimus spp. and Diplogasterida. Extraction efficiency varied between 42.0 to 88.8%. Considering costs, extraction efficacy, and cleanness, one sheet of Pulling Kitchen Towel (MONALISA Co., Korea) is selected.

Tetranychus urticae is extremely hard to control by conventional acaricides due to its rapid development of resistance to nearly all arrays of acaricide. As an alternative control measure of acaricide-resistant mites, RNA interference (RNAi)-based method has recently been suggested. A double-stranded RNA (dsRNA) delivery method using multi-unit chambers was established and employed to screen the RNAi toxicity of 42 T. urticae genes. Among them, the dsRNA treatment of coatomer I (COPI) genes, such as coatomer subunit epsilon (COPE) and beta 2 (COPB2), resulted in high mortality [median lethal time (LT50) = 89.7 and 120.3 h, respectively]. The transcript level of the COPE gene was significantly (F3,9 = 16.2, P = 0.001) reduced up to 24% following dsRNA treatment, suggesting that the toxicity was likely mediated by the RNAi of the target gene. To identify the deferentially expressed gene upon dsRNA ingestion, RNA-seq was employed to compare the transcriptional profiles between mites fed dsEGFP and dsCOPB2. Approximately 928 of genes were up- or down-regulated significantly (P < 0.05) compared to control and 182 genes were commonly responded to the treatment of both dsRNAs. Those dsRNA-responsible genes were mainly categorized into metabolic enzymes, transporters and secretory proteins. Further study would be necessary to elucidate the roles of dsRNA-responsible genes in mite’s dsRNA uptake and defense.

Soft rot caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum is a destructive disease of the fleshy storage tissues of vegetables and ornamentals that occurs worldwide. This study was carried out to find an effective method for evaluating soft rot disease on a massive scale in greenhouse and to screen resistant accession for the disease with lettuce germplasm. Spray method with 5 mL suspension of 109 colony formation unit per milliliter (CFU/mL) of P. carotovorum subsp. carotovorum per plant at the 6 ~ 7 foliage leaf stage was the most effective to evaluate soft rot disease. We evaluated resistance to soft rot using this method for 812 accessions of lettuce germplasm introduced from 52 countries. As the results, withered rates for each germplasm accession ranged from 0 to 100 percent and among 812 accessions of lettuce germplasm investigated, 21 accessions showed very high resistance. Among the 21 accessions, 11 accessions were from Korea, each 2 accessions were from USA and Israel, and each 1 accession was from Afghanistan, Germany, Hungary, Netherlands, Pakistan, and Uzbekistan. Accessions from Israel, Syria, and Afghanistan showed high resistance level. Among very high resistant 21 accessions, 12 were landraces, 6 were cultivars, and 3 were wild relatives. The 21 accessions were consisted of 12 leaf lettuce, 5 romaine type, 3 wild relatives, and 1 butterhead lettuce. Leaf lettuce accessions showed the highest resistance level while crisphead lettuce accessions had the lowest resistance level among the cultivated lettuce types. Wild relatives had greater resistance than landraces and cultivars. These accessions which resistance to soft rot will be used for soft rot resistance breeding program in lettuce.

본 연구에서는 FT-IR 스펙트럼데이터의 다변량 통계분석 기법을 활용하여 인도수집 옥수수 계통 및 품종으로부터 단백질 함량이 높은 옥수수를 신속하게 선발할 수 있는 선발체계를 확립함과 동시에 lysine과 tryptophan의 함량분석을 목적으로 연구를 수행하였다. 총 48시료의 인도수집 옥수수 계통 및 품종과 국내산 품종을 이용하여 종자로부터 FT-IR 스펙트럼을 조사하였으며, 무작위로 선발된 24시 료를 대상으로 총 단백질 함량을 조사하였다. 대조구로 사용한 광평옥 모계(GPO1)의 경우 단백질 함량 이 9.34 ± 0.3mg/g dw인데 비하여 H4 계통의 경우 단백질 함량이 10.26 ± 0.5mg/g dw로 48개 옥 수수 시료 중에서 가장 높게 나타났다. 특히 옥수수 H4, H6, H11, 그리고 H12 계통의 경우 총 단백질 함량이 각각 10mg/g dw 이상으로 측정되어 광평옥 모계(9.34mg/g dw)와 부계(9.36mg/g dw) 및 이 들의 F1(9.14mg/g dw)보다 총 단백질 함량이 높은 계통으로 판명되었다. Cross-validation test에서 옥수수 종자 내 총 단백질 함량예측 PLS regression model의 regression coefficient(R2) 는 0.77로 비교적 정확하게 총 단백질 함량예측이 가능한 것으로 나타났다. 따라서 본 PLS regression model을 이용하여 단백질 함량이 높은 사일리지 옥수수 계통의 선발이 가능할 것으로 기대되며, 더 나아가 다양 한 옥수수 계통의 신속한 대사체 수준 평가가 가능할 것으로 예상된다.

Insect growth regulators (IGRs) are compounds that induce developmental anomalies such as premature molting or supernumerary larval stages. IGRs can be divided into 3 groups based on their mode of action, one of which is known as the juvenile hormone agonists (JHAs). Previously, we have developed a novel screening method which can identify juvenile hormone antagonists (JHANs) using a yeast-two hybrid system incorporating Aedes aegypti juvenile hormone receptor complex proteins (MET and FISC). It has been reported that plants may use IGRs in their defenses against insect herbivores. In this study, 171 plant essential oil samples were screened using the yeast-two hybrid system in order to identify JHAs and/or JHANs. Eight out of 171 samples, 4 JHA and 4 JHAN candidates, were selected and their insecticidal activities were investigated against A. aegypti larvae. They showed high levels of insecticidal activities, with LC50 values ranging from 11.2~21.4 ug/ml. These results indicate that plants do use JHAs and/or JHANs as a part of their defenses against insect herbivores. Also, JHAs and JHANs identified in this study could be exploited as effective biological control agents.

Insect growth regulators (IGRs) are insecticides that disrupt the normal development of target insects by inducing symptoms such as premature molting or supernumerary larval stages. IGRs are categorized into three types based on their mode of action. One of the them is classified as juvenile hormone agonists (JHAs). Recently, we developed a yeast-two hybrid system that can identify potential juvenile hormone antagonist (JHAN) candidates using Aedes aegypti juvenile hormone receptor complex proteins, known as MET and FISC. In order to identify novel JHAN compounds, approximately 8,700 basic chemical compounds were screened using the yeast-two hybrid system. Among them, 35 compounds were first selected based on consistency of JHAN　activity, and their insecticidal activities were investigated against A. aegypti larvae. These compounds showed insecticidal activities about 1.7~3 times higher than that of pyriproxifen, which is a well known JHA insecticide. These results suggested that these JHANs can be used as effective JHAN insecticides.

The population of managed honey bees has been dramatically declining the recent past in worldwide. The one of most common disease of bees is nosemosis, the nosemosis is caused by microsporidia in the genus Nosema. Nosema apis and N. ceranae have been described as honeybee pathogens. These microsporidia are highly evoloved fungi with an obligately intracellular parasitic lifstyle. The disease causes significant detriment to honey production and results in economic losses. In our knowledge, Fumagillin is the only antibiotic approved for control of nosemosis in honey bees, however this antibiotic may have unintended effects on the honey bee host, ultimately contributing to increased prevalence and pathogenicity of Nosema. Therefore, we screened anti-Nosema substances from entomopathogenic fungal culture filtrates using in vitro polar tube germination assay. These fungal metabolites are employed as antibiotic agents. As results, Total 3 samples (23% of 13 total samples) showing the germinating inhibition against N. ceranae. This screening method may be useful for the detection of anti-Nosema substances from various samples and selected samples in this study may be a good feature to be used in the development of a new biocontrol method of nosemosis.

Due to its rapid development of resistance to nearly all arrays of acaricide, Tetranychus urticae is extremely hard to control using conventional acaricides. As an alternative control measure of acaricide-resistant mites, RNA interference (RNAi)-based methods have recently been suggested. A double-stranded RNA (dsRNA) delivery method using multi-unit chambers was established and employed to screen the RNAi toxicity of 42 T. urticae genes. Among them, the dsRNA treatment of coatomer I (COPI) genes, such as coatomer subunit epsilon (COPE) and beta 2 (COPB2), resulted in high mortality [median lethal time (LT50) = 89.7 and 120.3h, respectively]. The transcript level of the COPE gene was significantly (F3,9 = 16.2, P =0.001) reduced by up to 24% following dsRNA treatment, suggesting that the toxicity was likely mediated by the RNAi of the target gene. As a toxicity enhancement strategy, the recombinant dsRNA was generated by reciprocally recombining half-divided fragments of COPE and COPB2. The two recombinant dsRNAs exhibited higher toxicity than the respective single dsRNA treatments as determined using LT50 values (79.2 and 81.5h, respectively). This finding indicates that the recombination of different genes can enhance RNAi toxicity and be utilized to generate synthetic dsRNA with improved RNAi efficacy.

The intradermal test (IDT) has been developed for confirming diagnosis of canine atopic dermatitis (CAD). Prior to performing IDT, rapid immunoassay (Allercept E-screen 2nd generation; ES2G) can detect allergen-specific immunoglobulin E (IgE) antibodies in canine serum. The objective of this study was to evaluate agreement between IDT and immunoassay in diagnosis of CAD in domestic atopic dogs. Forty dogs were diagnosed with CAD in accordance with Favrot’s criteria. Intradermal testing was performed using 39 selected allergens. ES2G detected IgE antibodies specific for three allergen groups, including indoor allergens, grasses and weeds, and trees. Among 19 dogs diagnosed by IDT, the highest positivity was observed in house dust mites, followed by molds, epidermis and inhalants, house dust, and weeds. A total of 28 atopic dogs were evaluated by rapid ES2G immunoassay. Indoor allergens showed the strongest positive reaction, followed by grasses/weeds and trees. IDT and ES2G were performed concurrently in 17 dogs. The results of ES2G showed slight agreement with those of IDT. Level of agreement was highest for indoor allergens, which showed a predictive positive value of 100% in ES2G. These results indicate that a rapid immunoassay may be valuable for predicting the results of IDT in atopic dogs sensitized to indoor allergens.

목 적: 유아를 대상으로 한국과 일본에서 시행하고 있는 시력선별검사법을 비교 분석하여 개선을 위한 참고자료를 제안하고자 한다. 방 법: 유아(3~6세) 307명(614안)을 대상으로 한국과 일본에서 시행하는 시력선별검사를 실시하고, 표 준시시력표를 이용하여 나안시력을 측정하였다. 결 과: 한국과 일본의 시력선별검사 결과의 일치도는 낮았으며(k=0.40, p<0.001), 시력선별검사시표가 주된 요인으로 나타났다. 표준시시력표와 한국의 시력선별검사 결과는 일치도가 낮았으나(k=0.27, p<0.001), 표준시시력표와 일본의 시력선별검사 결과는 일치도가 높았다(k=0.89, p<0.001). 한국 시력선별 검사법 중 시력 판정 결과의 특이도(Specificity)는 100%로 높지만 연령별 민감도(Sensitivity)는 17.1% 이 하로 낮았다. 란돌트환시표를 사용하고 연령별 시력 판정기준을 다르게 적용했을 때 민감도와 특이도는 각 각 3세(시력 0.5 기준)에서 100.0%와 93.9%, 4세(시력 0.7 기준)에서 97.3%와 96.7%, 5세(시력 1.0 기준) 에서 85.4%와 99.1% 및 6세(시력 1.0 기준)에서 88.9%와 100.0%로 나타났다. 결 론: 현재 국내에서 유아를 대상으로 시행하는 시력선별검사법은 임상에서 적용하는 기준에 비하여 민감도가 낮다. 그러므로 그림시표를 란돌트환시표로 대체하고 연령별 시력의 판정기준을 다르게 적용할 필요가 있다고 사료된다.

Lonicera japonica 에탄올 추출물의 처리에 의하여 LPS에 의해서 활성화된 RAW 264.7 세포에서 NO의 생성량과 TNF-α, IL-1β 및 IL-6와 같은 염증성 사이토카인의 분비를 억제하였고, MAPK family인 ERK, p38 및 JNK의 인산화와 Iκ-Bα의 분해를 억제하였다. LPS로 유도한 endotoxin shock 동물실험에서 Lonicera japonica 에탄올 추출물 20 mg/kg에서 LPS로 유도한 endotoxin shock에 대한 생존율을 3배 이상 증가시켰으며, 생존시간도 1.3~1.4배 증가시켰다.