Invasive hornet Vespa velutina nigrithorax, which was found at Yeongdo, Busan for the first time in 2003, has been spreading to whole area of Gyeongnam and even to some southern parts of Gyeongbuk for last ten years, causing lots of damage. Urban area of Busan already showed dominant distribution of V. v. nigrithorax marking more than 90% of emergence rate by its spread, while in forest area, its rate had not been so high due to its competition with native Vespa species. However, recently dominance of this species was detected continuously in some forests in Busan. Thus, this study conducted a survey of emergence rate of V. v. nigrithorax at Mt. Bongraesan, Yeongdo-gu, Busan where it was discovered for the first time and also conducted observation of its behaviors related with competition for prey in order to understand its ecological niche relation with native Vespa species. Consequently, 4,560 individuals were collected in total out of main five species of Vespa at Mt. Bongraesan. Of these, V. mandarinia made up 8.7% with 397, V. crabro flavofasciata 21.2% with 965, V. analis parallela 23% with 1,048, V. simillima simillima 0.6% with 27, while V. v. nigrithorax made up 46.6% with 2,123, demonstrating the aspect of the most dominant emergence of V. v. nigrithorax. On the other hand, ecological niche due to competition for prey between V. v. nigrithorax and native Vespa species was revealed in the order of V. mandarinia >> V. crabro flavofasciata > V. analis parallela ≥ V. v. nigrithorax, telling ecological niche of V. v. nigrithorax was relatively low compared to native Vespa species, despite its dominant emergence. This background may explain why in forest area, V. v. nigrithorax had a limited spread and dominance compared to urban area of less competition among Vespa species. On the other hand, V. v. nigrithorax seems to have advantage in catching small insects due to developed agility with its smaller size than other Vespa species, and its rapid spread and adaptation in the local environment may be mainly attributable to its far more number of individuals than native Vespa species and consequent high reproductive rates and diversity of nesting site.

Cryptic color patterns in prey are classical examples of adaptations to avoid predation, but we still know little about behaviors that reinforce the match between animal body and the background. For example, moths avoid predators by matching their color patterns with the background, but the contribution of their behavior to their crypticity have not been well understood. Here, we report the previously underappreciated ability of moths to find the locally most cryptic spot and body orientation by using two species Hypomecis roboraria and Jankowskia fuscaria. We show that body positioning behavior, performed frequently by moths after landing on bark, results in a significant increase of the camouflage effect provided by their cryptic color pattern alone. We also found that moths recognize multiple background cues, such as furrow structure, visual patterns, and roundness to position and orient themselves. Our study demonstrate morphological adaptations, such as color pattern of moths, cannot be fully understood without taking into account a behavioral phenotype that coevolved with the morphology for increasing the adaptive value of the morphological trait.

2008년 8월, 중국을 통해 도입된 장수하늘소 1쌍으로부터 인공교미를 시켜 산란을 유도한 결과 총 42개의 알을 확보하였다. 교미와 동시에 산란목에 산란된 알은 30일이 경과된 후, 수거하여 각각 인공사료로 채워진 독립된 용기(온도 20℃, 상대습도 60%, 0L/24D)에서 무휴면 상태로 Growth chamber (SANYO MLR-351H)에서 인공증식을 시도하였다. 총 42개의 알에서 95%(40마리)의 부화율을 나타내었다. 부화한 40마리의 장수하늘소 유충은 1년 후에 32마리(80%), 2년 후에 19마리(59%), 3년 후에 8마리(42%)가 생존하였다. 동일한 사육조건하에서도 장수하늘소의 유충들은 체장과 두폭, 체중 등 각 개체 사이에 상당한 성장력의 차이가 나타났다. 가장 성장이 빠른 그룹 중 3마리의 경우, 2012년 3월초부터 섭식을 중단하고 전용단계에 들어간 후, 2012년 4월 중순에 번데기가 될 때 까지 총 3년 7개월의 기간이 소요되었다. 실험결과 장수하늘소의 1세대는 무휴면 상태에서 난기간은 약 14~20일, 유충기간은 약 1350~1360일(약 3년 7개월), 용기간은 약 21~28일, 성충기간 약 30~37일로 조사되었다. 따라서 장수하늘소의 알에서 성충까지의 최단 발육기간은 상기 실험 조건하에서 총 3년 9개월에서 10개월 정도 소요되는 것으로 나타났다.

지속가능하고 건강한 숲을 만들기 위해서는 산림관리에 필요한 인력, 장비 등이 이동할 수 있는 임도가 필요하다. 하지만 임도가 일부 환경을 훼손한다는 점에서 생태계를 교란하는 요인이 될 수도 있다. 본 연구는 임도가 곤충상에 미치는 영향을 알아보기 위해 가리왕산의 노린재군집을 조사하였다. 가리왕산은 현재 산림유전 자원 보호구역으로 지정되어 있다. 본 조사는 2012년 7월 30일부터 이틀 동안, 가리왕산 동쪽 하안미리에서 가리왕산 북쪽의 장전계곡까지 약 25 km를 이동하며 쓸어잡기 채집법을 이용하여 수행되었다. 또한, 임도를 따라 위치한 15개의 숲에서 60회의 쓸어잡기를 실시해 임도와 비교했다. 조사결과, 총 32종 198개체의 노린재가 관찰되었다. 최우점종은 가시노린재(Carbula putoni)로 33개체(16%)가 관찰되었고, 뒤를 이어 삿포로잡초노린재(Rhopalus sapporensis)가 27개체(13%), 눈박이알노린재(Coptosoma biguttulum) 20개체(10%)로 나타났다. 숲과 임도를 비교해 보면, 숲에서는 16종 37개체가 관찰되었지만 임도에서는 27종 161개체가 관찰되어, 임도가 숲에 비해 더 높은 종수와 풍부도를 나타냈다. 따라서, 임도는 노린재 군집의 다양성을 높이는데 긍정적인 영향을 미치는 것으로 판단된다.

An endoparasitoid wasp, Cotesia plutellae, contains a polydnavirus called C. plutellae bracovirus (CpBV) and induces various physiological alterations of parasitized host along with expressions of viral genes. Two host translation inhibitory factors (HTIFs) encoded in CpBV specifically inhibit host mRNAs at post-transcriptional level. They are expressed in late larval stage of Plutella xylostella parasitized by C. plutellae. To understand their late expression control, promoter region of an HTIF gene called CpBV15α was cloned by inverse PCR. The cloned HTIF upstream region (1,113 bp) possessed a putative JH response element (JHRE) and other promoter elements. The putative promoter region was rejoined with an open reading frame of enhanced green fluorescence protein (EGFP). When the recombinant vector construct was injected into early third instar larvae of nonparasitized P. xylostella, it was expressed in fourth larval instar at 72 h after injection, compared to relatively early expression in 24 h after injection of control construct containing a baculovirus immediate-early promoter. However, recombinant EGFP construct lost the late expression pattern when its promoter region was incomplete by truncating JHRE region. PYR application inhibited EGFP expression of the recombinant construct, but gave little influence on truncated constructs. Interestingly, when the complete promoter construct was injected to pupal stage, its late expression pattern was lost and showed early expression pattern. However, an addition of PYR to pupae, which had been injected with the complete promoter construct, inhibited the reporter gene expression. These results suggest that late expression of a HTIF (CpBV15α) is controlled by its promoter, which is sensitive to host JH titer.

An endoparasitoid wasp, Cotesia plutellae, parasitizes young larvae of the diamondback moth, Plutella xylostella, with its parasitic factors of polydnavirus, venom, ovarian proteins, and teratocytes (TC). TCs are originated from embryonic serosal membrane at hatch of C. plutellae eggs. TCs, after released in hemocoel of parasitized larvae, increased their average cell size from 20.6 μm to 77 μm during whole developmental period of the parasitoid larvae, but did not increase their cell number by maintaining about 150 cells per larvae. TCs of C. plutellae, are considered to be involved to extend the host larval development period and to arrest larval-pupal metamorphosis, were cultured in an insect cell culture medium for 21 days. Like TCs in parasitized larvae, in vitro cultured TCs showed increase in cell size, but did not show increase of cell number. Microinjection of in vitro cultured TCs significantly inhibited larva-to-pupa metamorphosis of nonparasitized P. xylostella, in which pupated host also showed extended larval period. Larvae injected with TCs exhibited alteration in expression of ecdysone receptor (EcR) and insulin receptor (InR) as well as in parasitized larvae. Teratocyte-secretory factors in culture medium showed this antimetamorphic effect on P. xylostella, while heat treated TC culture medium lost the effect. However, a successful parasitization of C. plutellae required both TCs and polydnavirus to alter host physiology.

Vector-borne plant virus transmission is a complex mechanism involving various interactions of viruses, vectors and plants. Plant viruses modify, either directly or indirectly, the rates of development, reproduction and behavior of vector insects in a positive, negative, or neutral manner. The sweetpotato whitefly, Bemisia tabaci, is the only known vector of Tomato Yellow Leaf Curl Virus (TYLCV) which is a virus that seriously damaged tomato cultivars all around the world. Acquisition of TYLCV influences on various developmental, physiological and molecular mechanisms of Q1 biotype B. tabaci. We compared several behavioral and physiological characteristics between non-viruliferous (NV) and TYLCV-viruliferous (V) of Q1 biotype whiteflies. When B. tabaci acquired TYLCV, total life span was shorter and fecundity was lower than NV ones. V whiteflies were more susceptible to thermal stress by increasing hsp mRNA levels but higher in mortality by either heat or cold shocks. Furthermore, V whiteflies increased the rates of plant sap probing and light attraction behaviors than NV ones. All together, our results show that TYLCV acquisition regulates B. tabaci to enhance the rates of development and environmental susceptibility. Our results provide insights to understand vector’s role in relation to the acquisition and transmission of plant viruses.

Lepidopteran pests monitoring in adult stage was generally performed using delta or corn typed trap including rubber septa impregnated sex pheromone (lure). Sometimes, unfortunately trapped samples were severly damaged because of biotic and/or abiotic environments such as micro-organism, predator and rain, sticky material, respectively. In our case, we monitored potato tuber moth, PTM, Phthorimaea operculella distribution during 2009~2012 in Korea. However, we encountered unexpected problem, another species can be trapped in species specific sex pheromone trap. Therefore, species confirmation was needed in trapped samples. Here we developed confirmation method by direct PCR (without DNA extraction) or sequencing methods which trapped samples that cannot identified by morphologically. We designed multi-plex PCR universal primers and species specific primers in rRNA region because to check the success of PCR and species identification. This direct PCR method can be applied in other species confirmation which monitored using pheromone trap.

제주도에서 재배되는 열대작물 중 망고(mango; Mangefera indica)의 재배면적과 농가수가 가장 많고, 재배품종은 대부분이 Irwin 계통이다. 현재 망고 수분에는 검정뺨금파리(Chrysomyia megacephala)가 농가에서 활용되고 있는 실정이다. 본 연구는 검정뺨금파리와 화분매개곤충으로 주로 활용되는 꿀벌(Apis mellifera)과 서양뒤영벌(Bombus terrestris)가 망고 수분 활동과 착과효율에 어떠한 영향을 미치는지 구명하고자 수행하였다. 2010년 4월 서귀포시 사계리에 위치한 농가에서 화분매개곤충별 활동력을 조사한 결과 검정뺨금파리는 낮동안에 활발한 활동을 한 반면 꿀벌과 뒤영벌은 낮은 활동성을 보였다. 방화시간은 꿀벌과 뒤영벌이 각각 6.1초와 5.8초인 반면에 검정뺨금파리는 379.9초로 꽃에 오래 머물며 꽃 위를 걸어다녔다. 꽃간 이동시간은 꿀벌과 뒤영벌이 각각 2.7초와 2.6초였고, 검정뺨금파리는 0.5초였다. 2010년 사계리 농가에서 착과율은 꿀벌과 뒤영벌구가 다소 높았지만 수정과율은 검정뺨금파리와 꿀벌구가 가장 높았다. 태흥리 소재 농가에서는 검정뺨금파리구가 착과수와 수정과수가 가장 높았고 서양뒤영벌구가 가장 낮았다. 2012년 가시리농가에서 착과율은 서양뒤영벌이 검정뺨금파리보다 다소 높았지만 검정뺨금파리를 투입한 구에서 수정과율이 가장 높았고 위수정과 발생량도 가장 낮았다. 결과적으로 꿀벌은 전체적으로 착과율과 수정과율은 전반적으로 낮은 경향을 보였다. 서양뒤영벌은 착과율과 수정과율이 2012년 조사에서만 다소 높게 나왔지만 위수정과의 발생량이 매우 높았다. 검정뺨금파리는 세 지역 결과를 모두 종합하면 착과와 수정과 발생이 균일하게 안정적으로 이루어졌고 위수정과 발생이 가장 적어 망고 수분에 유리한 것으로 판단된다.

친환경농산물의 생산량이 늘고 green korea의 국가 정책과 화학비료 사용량의 감소와 더불어 녹비재배 면적이 증가하고 있으나 이에 대한 환경평가는 이루어지지 않고 있다. 따라서, 본 연구는 사과와 배 재배지에서 피복작물로써 재배되는 헤어리벳치구와 일반잡초 제초구, 화학제초구에서 5월부터 7월까지 채집된 곤충상 을 조사하였다. 곤충상 조사는 주로 천적종류를 대상으로 하였으며 청색과 황색 끈끈이트랩을 월 1회 3일간 설치하여 조사하였고, 황색수반에 포르말린 3%액을 월 1회 3일간 설치하여 유살된 천적종류를 조사하였다. 2011년, 배의 헤어리벳치구에서는 총 132마리의 천적이 끈끈이트랩에 유살되었으며, 가장 많이 유살된 종은 광붙이꽃등에로 62마리, 꼬마꽃등에 43마리 였다. 사과의 경우 초생 및 친환경방제구에서 56마리의 천적이 유살되었으며 가장 많이 유살된 종은 고치벌과에 24마리, 좀벌과에 10마리 였다. 가장 낮은 천적이 유살된 구는 배 초생 및 화학방제구와 사과 초생 및 화학방제구로 30마리 이하였다. 2012년, 헤어리벳치의 개화시기인 5월에 황색수반에 채집된 천적종수는 395마리로 가장 많았으며 개화가 끝난 시기인 7월에 황색수반에 채집된 천적종수는 116마리로 헤어리벳치가 심겨지지 않은 과원보다 월등히 높았다.

토마토 녹응애의 조기 예찰을 위하여 Lavel Sticker를 이용하는 방법을 연구하였다. 토마토 녹응애는 2쌍의 다리를 가진 길이 134.9um의 미소동물로 눈에 보이지 않아 토마토 재배시 조기에 발생을 예찰하기는 불가능 하다. 충남 논산의 유기농 토마토 재배지에서는 4월 말 아래 줄기에서 처음 발생하기 시작하여 6월 20일 72.8마리로 밀도가 가장 높았고, 무농약 토마토 재배지에서는 5월 14일 아래와 중간 줄기에서 처음 발생하기 시작하여 6월 20일 70.2마리로 밀도가 가장 높았다. 발생이 시작되는 동일 시기에 발생된 잎을 건전주에 접종후 개체군 증가를 조사한 결과, 6월 1일부터 20일 사이에 최대 발생량을 보였고 기온이 높아지면서 급격히 밀도가 낮아졌다. 40배의 투과현미경 하에서 빛을 투과시키고 측광을 주였을 때 Lavel Stidker의 색깔별 녹응애 발견시간을 조사한 결과 녹색의 Lavel Sticker에서 가장 짧았다.

In the case of one standard-mum polyvinyl house, the density of F. occidentalis reached its peak in early June and decreased after the chemical control, which was carried out periodically. In the case of another standard-mum polyvinyl house, the density of F. occidentalis increased continuously in spite of the periodical chemical control after planting. In both polyvinyl houses, the density of F. occidentalis began to increase mid-May. The numbers of F. occidentalis collected on a tray with wet paper by heating the flowers of pink, white, and yellow Chrysanthemum standard mums were 18.4, 56.6, and 52.6 after flowering, but in the case of the leaves, the numbers were 7.8, 16.6, and 15.4. Also, the numbers of F. occidentalis collected on a tray with wet paper by heating the buds of pink, white, and yellow Chrysanthemum standard mums were 15.2, 45.8, and 41.6, but in the case of the leaves, the numbers were 2, 8.8 and 3.4. In the Y-tube olfactometer test, the frequency of F. occidentalis’ visits to one side arm of the Y-tube olfactometer was higher in the odor cue of the white flower than of the yellow, red, and violet flowers, but in the other combinations without white flowers, the frequency was higher in the odor cue of the violet and red flowers than of the yellow flowers. In the case of the four-choice olfactometer test, in the same visual cues as the odor cues of the pot mum flowers, the frequency of F. occidentalis was higher in the yellow flower than in the other flowers (white, red, and violet) in all the observation times (10, 15, and 20 minutes). In the case of the visual cues with disturbed odor cues, F. occidentalis preferred the yellow color to the other colors in all the observation times (10, 20, and 40 minutes). F. occidentalis preferred the white color to the other colors when the same odor cues as the flower color were provided, but the odor cue of the yellow flower was provided only without the color cue.

날개매미충(Pochazia sp.)은 기주식물을 흡즙하여 피해를 주는 것 보다 산란행동과정에서 발생하는 피해가 더 심각하다. 이는 암컷 성충이 가지고 있는 톱니모양의 생식기로 1년생 가지의 피목을 벗기고 그 자리에 산란을 함으로써 물관부와 체관부를 손상시키기 때문이다. 갈색날개매미충은 7월 하순부터 약충태에서 성충으로 우화하기 시작하고, 한 달 후인 8월 하순부터 산란을 한다. 이 시기는 작물의 수확기와 맞물려 화학 살충제 사용이 매우 제한적일 수밖에 없다. 본 연구는 친환경식물추출물 살포와 더불어 해충의 개체수를 줄이고, 산란하기 위해 과원으로 유입되는 갈색날개매미충 성충을 차단하는 방법으로 식물추출물질을 사용하여 갈색날개매미충의 후각행동특성을 바탕으로 기피효과와 유인효과를 연구하였다. 기피식물로는 백합, 유인식물로는 누리장나무를 사용하였다. 각각의 식물체들을 98% methanol에 추출한 추출물과 methanol 추출믈을 vacuum evaporator를 사용하여 농축시킨 농축물을 각각 처리하였다. 실험결과 백합의 기피효과 실험에서 백합식 물체 처리구, 백합추출액 처리구에서 갈색날개매미충이 유의적 차이를 보이며 접근을 기피하는 것을 확인 할 수 있었다. 하지만 백합농축액에서는 기피효과를 확인할 수 없었다. 누리장나무의 유인효과 실험에서는 누리장나무식물체 처리구, 누리장나무추출액 처리구, 누리장나무농축액 처리구 모두에서 유의적 차이를 보이며 유인효과를 확인 할 수 있었다.

구기자는 주로 열매를 약용으로 사용할 목적으로 재배되고 있다. 구기자는 충청남도 청양, 공주, 보령, 홍성, 전라남도 진도, 해남에서 주로 재배되고 있으며, 최근 구기자의 친환경재배가 점차 확대되어 가고 있다. 하지만 화학살충제, 화학비료를 사용하지 않는 포장에서는 여러 종류의 해충에 의한 피해가 증가하여 구기자의 친환경재배시 어려움을 주고 있다. 완전한 친환경재배를 위하여 구기자의 작기에 따라 발생하는 주요 해충의 생태조사를 통하여 방제법을 마련하고 해충에 대한 피해를 최소화하기 위한 기초자료를 확보하기 위하여 본 연구를 실시하였다. 본 연구는 청양 대치면 상갑리 일원의 5개의 친환경 농가를 중심으로 5월 초순부터 9월 초순까지 해충의 발생상을 조사하였다. 주로 구기자재배 시 피해가 심하다고 보고된 복숭아혹진딧물(Myzus persicae), 열점박이잎벌레(Lema decempunctata), 28점박이무당벌레(Henosepilachna vigintioctomaculata), 구기자혹응애(Eriophys macrodonis Keifer), 갈색날개노린재(Plautia stali Scott), 뿔나방류(Hedma spp.)를 중점적으로 조사하였다. 조사방법은 sticky trap을 하우스 4방향에 설치하여 발생하는 해충의 종류를 조사하였고, sweeping과 육안샘플조사를 통해 구기자 작기 중 주요 해충의 발생생태를 조사하였다. 그 결과, 구기자나무에 본잎이 나오는 초엽기인 5월 중순에는 복숭아혹진딧물과 열점박이잎벌레의 피해가 심하며, 6월 중순에서 7월 하순사이의 성엽기에는 구기자혹응애, 28점박이무당벌레, 뿔나방류의 피해가 심해진다. 열매가 열리는 7월하순부터는 열매를 흡즙하는 노린재류의 피해가 심해지는데 특히 썩덩나무노린재, 갈색날개노린재의 피해가 심하다.

제주지역 감귤에 발생하는 해충종류는 1990년대 조사에서 31과 74종이 발생되는 것으로 보고되었다. 본 연구에서는 그 동안 친환경재배와 병해충종합관리기술 채용, 새로운 품종의 도입 등에 따라 발생 해충의 종류와 피해도가 달라지고 있어 이를 구명하기 위하여 조사, 연구를 수행하였다. 조사는 2009～2011년(3개년)에 걸쳐 이루어졌으며, 이 기간에 조사된 해충은 33과 67종이었다. 본 연구에서 추가로 피해가 확인된 해충은 7과 10종이었으며, 1990년대에 비해 피해가 줄어든 해충은 귤응애, 꽃노랑총채벌레, 뒷흰날개밤나방 3종이었으며, 피해가 증가한 해충은 귤녹응애, 볼록총채벌레, 애넓적밑빠진벌레 등 13종이었다. 특히 감귤에 피해를 주는 총채벌레는 꽃노랑총채벌레와 볼록총채벌레인데, 꽃노랑총채벌레는 가온시설재배 감귤에서 주로 문제가 되었으나 재배면적이 감소에 따라 피해가 줄어들었으나 볼록총채벌레는 2007년부터 서귀포시 남원읍지역의 노지재배 감귤에 피해를 주기 시작하여 현재는 도 전역에 걸쳐 피해가 나타나고 있다. 응애류 중 귤응애는 유기합성 살충제의 사용감소와 초생재배 확대 등에 따라 감소한 반면, 귤녹응애는 살비제 사용감소로 그 피해가 증가한 것으로 추정된다.

Adoxophyes paraorana는 배, 사과 등의 주요 해충으로, 국내에는 A. honmai 및 A. orana와 혼재되어 있다가 2012년에 들어서야 새로운 신종으로 보고되었다(Byun et al., 2012). 이에 따르면 A. paraorana는 국내에 기 보고된 A. orana, A. honmai와 매우 유사한 형태적 특징을 가지고 있어 구분이 쉽지 않고, COI 바코드를 이용한 분자생물학적 연구에서는 약 5% 정도의 염기서열상의 차이를 보이고 있다. 그러나 최근 종간 구분 및 분류에 COI 바코드 유전자를 이용하는데 대한 문제점이 거론되고 있고, 특히 COI 유전자보다 다른 mtDNA 유전자에서 종간 구분에 필요한 차이가 더 많이 나타나기도 하여 이에 대한 비교연구가 진행되고 있는 상황이다. mtDNA 상의 12 가지 대표적인 단백질 발현 유전자들을 대상으로 Adoxophyes complex내 세 종의 염기서열의 차이를 비교하였다. 그 결과, COI에 비해 더 큰 차이를 나타내는 유전자들이 확인되었으며, 이를 속내 변이 수준에서 Cameron (unpubl. data)의 데이터와 비교한 결과, 서로 다른 속에서도 일정하게 큰 종간 차이를 나타내는 유전자는 COI 보다는 ND6, CytB, 그리고 ND5인 것으로 확인되었다. 따라서 Adoxophyes complex와 같은 유사 해충 종간의 구분을 위한 specific primer set의 개발은 ND6와 같은 유전자를 대상으로 하는 것이 COI에 비해 더 명확한 결과를 나타낼 것으로 판단된다.

Varieties of Bacillus thuringiensis (Bt) crystal proteins, Cry proteins, have so far been found as one of the most successful biological control agents which are safe to natural environments for a long time. Recently, cry genes encoding these Cry proteins have been widely applied for construction of transgenic crops resistant to pest insects. In this study, through the 3D structure prediction and accompanying mutagenesis study for the Mod-Cry1Ac, 7 and 16 amino acid residues from domain I and II, respectively, responsible for its insecticidal activity against larvae of Spodoptera exigua and Ostrinia furnacalis were identified. To construct novel cry genes with improved insecticidal activity, we randomly mutated these 23 amino acid sequences by in vitro muti site-directed mutagenesis, resulting in totally 24 mutant cry genes. For further characterization, these mutant cry genes were expressed as a fusion protein with polyhedrin using baculovirus expression system. SDS-PAGE analysis of the recombinant polyhedra revealed that expressed Cry proteins was occluded into polyhedra and activated stably to 65 kDa by trypsin. In the further study, we plan to investigate their insecticidal activity against Plutella xylostella, S. exigua and O. furnacalis larvae.

The baculovirus expression system is one of the most popular methods used for the production of recombinant proteins but has several complex steps which have proved inherently difficult to meet a multi-parellel process. We have developed a novel recombinant bacmid, bEasyBm that enabling easy and fast generation of pure recombinant virus without any purification step. In the bEasyBm, attR recombination sites were introduced to facilitate the generation of recombinant viral genome by in vitro transposition. Moreover, extracellular RNase gene from bacillus amyloliquefaciens, barnase, was expressed under the control of Cotesia plutellae bracovirus early promoter. Therefore, only when the barnase gene was replaced to gene of interest, the bEasyBm could replicate in host insect cells. When the bEasyBm was transposed with pDualBac-EGFP and pDualBac-LUC respectively, there were no non-recombinant backgrounds were detected from unpurified BmEasy-EGFP or BmEasy-LUC stocks. In addition, the resulting recombinant virus, BmEasy-EGFP, showed comparable level of EGFP expression efficiency with the plaque-purified recombinant virus, BmEGFP, which was constructed using bBmGOZA system. Based on these results, high-throughput condition for generation of multiple recombinant viruses in a time was established.

Bacillus thuringiensis serovar mogi of a novel serogroup (H3a3b3d), which showed mosquitocidal activity against Anopheles sinensis and Culex pipiens pallens, was isolated from fallen leaves in Mungyeong city, Republic of Korea. In contrast to the complicated plasmid profiles of B. thuringiensis H3 serotype strains, the B. thuringiensis serovar mogi contained only megaplasmid (> 30 MDa) on which the toxin genes were occasionally located. Sequence analysis using 454-pyrosequencing revealed that the megaplasmid harbored at least seven putative cry genes, showing about 84%, 75%, 73%, 58%, 84%, 39% and 75% similarities in amino acid sequences with Cry27Aa, Cry19Ba, Cry20-like, Cry56Aa, Cry39ORF2, Cry8Ba and Cry40ORF2, respectively. These cry genes were cloned to the Escherichia coli-B. thuringiensis shuttle vector, pHT1K, and then introduced into an acrystalliferous B. thuringiensis Cry-B strain for further molecular characterization. To investigate the role of these genes in crystal production, the expression profiles of these toxin genes were analyzed by quantitative real-time PCR (qrtPCR) from the wild type strain as well as transformant strains. The results clearly indicate that the cry39orf2 was the dominant ingredient in the crystal. This novel 3a3b3d type strain, B. thuringiensis serovar mogi, could be used as a good resource for studying unknown mosquitocidal cry genes.

Among hemipteran insects which is the most important insect vector of plant viruses, small brown planthopper, Laodelphax striatellus, transmits the rice stripe virus (RSV) causing rice stripe disease. For effective control of RSV, it is important to understand interaction between RSV and L. striatellus. Therefore, in this study, expressed sequence tag (EST) databases were generated based on 454 GS-FLX pyrosequencing for comparative transcriptome analysis between nonviruliferous and RSV-viruliferous L. striatellus. By comparing the two EST libraries, we showed that 108 host genes were significantly up-regulated and 28 host genes were significantly down-regulated in viruliferous insects. Interestingly, genes encoding ribosomal proteins were mainly up-regulated in viruliferous L. striatellus, whereas genes related to translation were concentrated in the downregulated cohort. These RSV-dependently regulated genes may have important function in the behavior of planthopper or the transmission of RSV.